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农药薄荷脑的质量标准研究 薄莲脑注射液是指嘴唇科植物的薄荷（meshahalectalyxbirq）的新鲜茎和叶通过蒸汽蒸馏而获得的，然后是冷冻和提取的结晶。本品为无色透明棒状晶体, 有薄荷的特殊香气, 味初灼热, 后清凉, 是一种饱和环状醇。薄荷脑有清凉和抗炎作用, 可作为许多中成药的君药。虽然中成药及合成制剂中薄荷脑的含量测定方法有过报道, 但薄荷脑原料药的质量控制方法尚未建立。笔者采用毛细管气相色谱法对薄荷脑原料药建立了质量控制方法, 并且取得满意结果。 1 材料和方法 1.1 药品、试剂与仪器 GC-7890Ⅱ (上海天美) SEPU3000工作站, 电子天平:SartoriusBP211D。 薄荷脑化学对照品 (中国药品生物制品检定所, 批号0728-200005规格100mg) ;癸醇 (中国医药集团上海化学试剂公司, 色谱标准) ;薄荷脑原料药 (湖北中医学院提供) , 其它试剂均为分析纯。 1.2 高纯氮载气系统 使用FFAP (聚乙二醇20M与2-硝基对苯二甲酸的反应产物) 毛细管色谱柱 (30m×0.53mm×1μl) ;高纯氮 (99.999%) 为载气, 载气流量:15ml·min-1, 尾吹:20ml·min-1, AIR:300ml·min-1, H2:30ml·min-1, 不分流进样;进样器温度:200℃;检测器:FID温度230℃:柱温:80℃保持一分钟, 按每分钟升2.5℃至150℃, 维持5分钟。进样量:0.50μl。 1.3 去薄荷香气去轻油 取本品1g, 加硫酸20ml使溶解, 即显红色。24小时后析出无薄荷香气的无色油层 (与麝香草酚的区别) ;取本品50mg, 加冰醋酸1ml使溶解, 加入硫酸6滴与硝酸1滴的冷混合液, 仅显淡黄色 (与麝香草酚的区别) 。 1.4 试验品及对照品溶液的制备 系统适用性试验:分别称取薄荷脑和癸醇适量, 用乙醇制成每1ml含10mg的混合溶液, 量取0.50μl注入气相色谱仪, 记录色谱图, 薄荷脑峰与癸醇峰之间的分离度大于1.5。 (图1) 供试品溶液的制备:取本品约1g, 精密称定, 置10ml量瓶中, 加乙醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 制成100mg·ml-1的供试品溶液。 对照品溶液的制备:取供试溶液0.10ml至10ml的容量瓶中用乙醇稀释至刻度, 制成1mg·ml-1的对照品溶液。 测定:分别精密量取对照品溶液和供试品溶液0.50μl注入气相色谱仪, 记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍, (图2) 表明各杂质峰面积小于对照品溶液主峰面积, 杂质峰面积之和占总面积的0.44%。 1.5 标准曲线及检测限 内标溶液的制备:精密称定癸醇对照品100mg, 置于10ml容量瓶中, 加乙醇稀释至刻度, 配制成含癸醇10mg·ml-1的内标溶液。 校正因子的测定:取薄荷脑对照品100mg, 置于10ml容量瓶中, 用无水乙醇稀释至刻度, 摇匀。再吸取1ml置于10ml容量瓶中, 精密加入内标溶液1ml, 用无水乙醇稀释至刻度, 摇匀, 取0.50μl注入色谱系统, 记录峰面积计算校正因子,f=1.169, RSD=0.3% (n=3) 。 标准曲线的绘制:取薄荷脑标准对照品适量, 配制成10mg·ml-1的标准对照品储备液。再分别吸取0.70ml、0.80ml、0.90ml、1.00ml、1.10ml、1.20ml、1.30ml于10ml量瓶中, 并加入10mg·ml-1的癸醇内标标准溶液1ml, 用无水乙醇稀至刻度。得到浓度分别为0.70mg·ml-1、0.80mg·ml-1、0.90mg·ml-1、1.00mg·ml-1、1.10mg·ml-1、1.20mg·ml-1、1.30mg·ml-1系列标准溶液。各进样0.5μl, 记录色谱图。采用薄荷脑峰面积与癸醇峰面积之比Y对浓度作线性回归。标准曲线:Y=0.04959+1.03707C, 范围0.70mg·ml-1～1.30mg·ml-1,r=0.99986, 检测限:5μg·ml-1。 测定:分别取样品及标准品适量, 用乙醇溶解, 再加入浓度为10mg·ml-1的内标溶液 (癸醇)1ml并用乙醇稀释成含薄荷脑1mg·ml-1的供试品溶液和标准品溶液, 分别取标准品溶液和供试品溶液0.5μl进样, 记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍, 采用内标对照法计算含量 (见表1) 。 1.6 标准品溶液的配制 分别量取10mg·ml-1的供试品溶液0.80ml、1.00ml、1.20ml于10ml量瓶中, 加入10mg·ml-1的癸醇内标标准溶液1ml, 用无水乙醇稀至刻度, 配成0.80mg·ml-1、1.00mg·ml-1、1.20mg·ml-1的溶液。另取标准品适量稀释成1mg·ml-1, 制成对照液,