SN_T 3381-2012出口食品中烟曲霉素残留量的测定 液相色谱法-质谱/质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3381—2012出口食品中烟曲霉素残留量的测定液相色谱-质谱／质谱法Determination of fumagillin residues in foods for export-LC-MS/MS method2013-07-01实施2012-12-12 发布中华人民共和国发布0国家质量监督检验检疫总局屋盆肉 SN/T 3381--2012前 言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国河北出入境检验检疫局。本标准主要起草人：艾连峰、王凤池、陈瑞春、郭春海、李玉玲、段文仲、苏萌。I SN/T 3381—2012出口食品中烟曲霉素残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法1 范围本标准规定了出口食品中烟曲霉素残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于蜂蜜、鱼肉、鸡肉、鸡肝和鸡肾中烟曲霉素残留量的测定和确证。2方法提要样品中的分析物用乙腈或磷酸盐缓冲液提取，提取液经强阴离子交换固相萃取柱净化后，用液相色谱-质谱/质谱测定，外标法定量。3试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。3.1乙腈,液相色谱纯。3.2甲醇,液相色谱纯。3.3甲酸，液相色谱纯。3.4乙酸铵，液相色谱纯。3.5 氨水。3.6 磷酸氢二钠。3.7无水硫酸钠：650℃灼烧4h,在干燥器内冷却至室温，储于密闭容器中备用。3.8氢氧化钠。3.95mol/L氢氧化钠溶液：100ig氢氧化钠（3.8)溶解于50mL水中,加水定容至 500 mL。3.100.05mol/L磷酸盐缓冲溶液：3g磷酸氢二钠(3.6)溶解于450,mL水中，用氢氧化钠溶液(3.9)调节 pH一11,加水至 500 mL,使用前配制。3.115%氨水溶液：量取5mL氨水（3.5).用水定容至100lmL。3.125%甲酸甲醇溶液：量取5mL甲酸(3.3），用甲醇定容至100mL。1 mol/L乙酸铵溶液：0.39g乙酸铵3.4)加水溶解至500 mL。3.14定容液：取乙70mL，加人30mL的0.01mol/L乙酸铵溶液（3.13），混匀。3.15烟曲霉素标准物质：Fumagillin,C2.H34Oz，CAS号：23110-15-8,纯度大于或等于95%。3.16标准储备液：精确称取适量标准品（3.15），用乙睛配制成100μg/mL的标准储备液。此溶液避光一20℃冷冻保存3个月。3.17标准中间液：取适量标准储备液（3.16)用乙睛配制成浓度为1μg/mL的标准中间液，现用现配。3.18空白基质溶液：选取不含待测物的样品，按照步骤6.1和6.2操作，得到空白基质溶液。3.19基质标准工作溶液：根据需要，用空白基质溶液(3.18)稀释标准中间溶液(3.17)成适合浓度的混合标准工作溶液，现用现配。3.20混合型强阴离子交换固相萃取柱(MAX):60 mg,3mL;或相当者,使用前用3mL甲醇,3mL水预处理。1 SN/T 3381—20123.21微孔滤膜:0.22 μm，有机系。4仪器和设备4.1高效液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI)。4.2分析天平:感量为 0.01 g,0.1 mg。4.3均质器,转速不小于 15 000 r/min。4.4离心机,转速不小于 4 000 r/min。4.5氮吹仪。4.6具塞棕色离心管,50 mL。4.7棕色容量瓶,25 mL。5样品制备和保存5.1制样要求制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5. 2 肉、肝脏、肾脏类及鱼肉取样品中有代表性的可食部分约500g，用粉碎机粉碎，装人洁净容器作为试样，密封并做好标识，于一18℃冰箱内保存。5.3蜂蜜取有代表性样品约500g，未结晶样品将其用力搅拌均匀，有结晶析出样品可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中，待样品全部溶化后搅匀，迅速冷却至室温。制备好的样品装人洁净容器内密封并做好标识，室温保存。6测定步骤6.1提取6. 1. 1 鸡肉、肝脏、肾脏、鱼肉称取试样约5g（精确到0.01g)于 50 mL离心管中，加人 5 g无水硫酸钠（3.7）,15 mL乙腈15000 r/min均质提取1min，4000 r/min离心10 min，将上清液转移至 25 mL棕色容量瓶中。用10 mL 乙腈重新提取残渣一次，合并提取液于同一容量瓶中,并用乙腈定容至25 mL，分取 5mL，40℃氮吹至近干，加人5 mL磷酸盐缓冲溶液（3.10)溶解残渣。6.1.2蜂蜜称试样约2g(精确到0.01g)于50mL离心管中,加人10mL磷酸盐缓冲溶液(3.10)振摇溶解。6.2　净化将磷酸盐溶解液以小于2mL/min 流速过MAX柱（18)，然后依次用3