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迷迭香酸稳定性的影响因素研究 氨基酸[r（e）]-[3-（3-羟基苯基）-1-氧代-2-羟基二苯基]-3，4-二羟基苯丙酸。1958年首次从迷迭香植物(Rosmarinuso ffinalis)中分离得到,是一种水溶性的多酚类化合物。由于迷迭香酸具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒、抗血栓和抗血小板聚集、抑制透明质酸酶等多种生物活性,因此越来越受到人们的关注,在国内外食品、化妆品、医药等方面已有着广泛的应用。为此迷迭香酸的添加及贮藏条件就显得尤为重要,但目前罕有关于迷迭香酸稳定性方面的报道。本文对各种处理条件下迷迭香酸的稳定性进行了比较全面的研究,找出影响稳定性的各种因素,为迷迭香酸的安全使用及进一步开发利用提供科学依据。 1 材料、试剂和设备 1.1 材料表面 纯度80%以上的迷迭香酸天然提取物(本实验室制备),迷迭香酸标准品(Sigma)。 1.2 化钾、氯化钠、氯化钾、三各酸钠、白砂糖、山梨酸钠、三氮酸钠、三氮酸钠、三氮酸钠、三氮酸钠、三氮酸钠、三氮酸钠等食品级 甲醇、乙睛(Merck)均为色谱纯;磷酸、氢氧化钠、盐酸、氯化钾、氯化钠、氯化镁、氯化锌、氯化钙、氯化锰、氯化铝、氯化铁、苯甲酸钠、抗坏血酸、过氧化氢、焦亚硫酸钠均为国产分析纯;蔗糖、食盐、山梨酸钾均为食品级;试验中所用的水均为三重蒸馏水。 1.3 wsz-33-65型热电升温水浴锅 PC2001型高效液相色谱仪:天津市兰博实验仪器设备有限公司;WSZ-133-65型电热恒温水浴锅:上海精密仪器仪表有限公司;FA2004A型电子天平:上海精天电子仪器有限公司;sartorius PB-10型酸度计:赛多利斯科学仪器有限公司。 2 方法 2.1 高效液相色谱法 取迷迭香酸标准品10.000 mg,用三重蒸馏水配成100 mL水溶液,取此液10、8、6、4、2 mL,分别置于干净具塞试管中,并加三重蒸馏水体积为0、2、4、6、8 mL,充分混匀后,用高效液相色谱检测。以峰面积与标准溶液的质量百分比浓度C(μg/m L),求回归方程。 色谱柱为VP-ODS(150×4 mm),柱温为25℃,检测波长为280 nm,流动相为水(含0.1%H3PO4)和乙腈(60∶40),流速为0.5 mL/min。 2.2 样品溶液的制备 精确称取迷迭香酸样品1.000 g,用水充分溶解,定容100 mL。 2.3 香酸的稳定性研究 2.3.1 样品溶液的ph值 用氢氧化钠、盐酸配制pH值为3~9的溶液待用。取等量的样品溶液,分别用不同pH值的溶液稀释至相同体积,于室温避光条件下保存。定时取样用高效液相色谱法检测溶液中迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.2 光对偶氮胺稳定性的影响 取等量的样品溶液,分别置于具塞试管中,在室内避光、室内散射光和日光直射3种条件下进行试验,定时取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.3 保存率的测定 取等量的样品溶液,分别置于10 mL比色管中,于20、40、60、80、100℃的恒温水浴中加热,定时取出冷却到室温后,测定溶液中迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.4 保存率的测定 取等量样品溶液,分别加入一定量含Na+、K+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Mn2+、Al3+、Fe3+相同浓度的水溶液,混匀后室温避光放置,设对照,定时取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.5 保存率的测定 取等量的样品溶液,分别加入一定量含食盐和蔗糖浓度为1%、2%、4%、6%、8%、10%的水溶液,混匀后室温避光放置,设对照,取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.6 保存率的测定 取等量的样品溶液,分别加入一定量含苯甲酸钠和山梨酸浓度为0.05%、0.08%、0.1%、0.2%的水溶液,混匀后室温避光放置,设对照,定时取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.7 保存率测定 取等量的样品溶液,分别加入一定量含抗坏血酸浓度为0.1%、0.2%、0.4%、1%的水溶液,混匀后室温避光放置,设对照,定时取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 2.3.8 保存率的测定 取等量的样品溶液,分别加入一定量含过氧化氢和焦亚硫酸钠浓度为0.05%、0.1%、0.2%的水溶液,混匀后室温避光放置,设对照,定时取样测定迷迭香酸含量,计算保存率。 3 结果与分析 3.1 绘制标准曲线 采用高效液相色谱法,以迷迭香酸的标准品在其最大吸收波长280 nm处绘制标准曲线,如图1所示。 求得迷迭香酸的回归方程为:Y=8424.8X+16953,R2=0.9994,浓度在20.000 mg/L~100.000 mg/L范围内呈线性关系。 3.2 迷迭香酸含量 从图2可以看出,在pH3~6的条件下迷迭香酸的含量变化较小;在pH7~9条件下迷迭香酸的含量略有下降,到第5天时测定,迷迭香酸含量变化趋于