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不同初始密度对种间竞争的影响 赤潮是全球海上生态灾害。近年来,我国近岸海域赤潮发生的频率、波及范围和危害程度呈上升趋势。尤其养殖环境的恶化和富营养化水平的提高,使赤潮发生的频率显著提高。赤潮的发生对海洋生态环境、渔业资源和海水养殖业直接或间接的造成了不可估量的负面影响,成为当前污染生态学研究的热点之一。而且,近海富营养化和有害赤潮由于其全球性、多发性、复杂性和危害严重等特点,早已成为国际社会共同关注的、新出现的重大海洋环境问题中亟需研究解决的涉及全球变化的重大领域之一。由于赤潮生消过程及其与物理、化学和生态学过程相互作用的复杂性,特别是对赤潮生物孢囊萌发和上浮、种群增殖和生物竞争、摄食等过程的了解尚少,因此到目前为止有关赤潮全过程及成因的定量评价资料十分贫乏,以致绝大多数赤潮原因种的种群动力学机制及其发生赤潮机理尚未被阐明。研究表明,引发赤潮发生的因素除了外因(富营养化、重金属元素、小分子刺激生长物质等)外,还有赤潮生物自身的内部因素(生长率、被捕食率、聚集性和孢囊的形成与萌发等)。其中,环境中赤潮生物的本底生物量是影响赤潮发生的关键性因素之一。本文选择3种赤潮藻种,探讨了不同起始密度对其种间生长竞争关系的影响,为阐明赤潮生物的竞争关系和赤潮发生的机制提供有价值的参考资料。 1 材料和方法 1.1 赤潮藻种tum 实验所用的中肋骨条藻(Skeletonema costatum)、赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense)取自中国海洋大学微藻培养中心,三者均属赤潮藻种。 1.2 初始浓度接种 将处于指数生长期的微藻藻液按照0.2×104,0.4×104,0.8×104cell/ml的起始浓度接种,同时设4个平行样,3种藻的处理相同。 1.3 在混合养殖的实验中，有三个治疗组 (1) 初始密度和接种比例 Ⅰ.赤潮异弯藻(简称H)的起始密度为0.2×104cell/ml,中肋骨条藻(简称S)的起始密度为0.8×104cell/ml,接种比例为H∶S=1∶4;Ⅱ. 赤潮异弯藻和中肋骨条藻的起始密度均为0.4×104cell/ml,接种比例为H∶S=1∶1;Ⅲ. 赤潮异弯藻的起始密度为0.8×104cell/ml,中肋骨条藻的起始密度为0.2×104cell/ml,接种比例为H:S=4:1;每个处理组设4个平行样。 (2) 初始密度和接种比例 Ⅰ.塔玛亚历山大藻(简称A)的起始密度为0.2×104cell/ml,赤潮异弯藻(简称H)的起始密度为0.8×104cell/ml,接种比例为A∶H=1∶4;Ⅱ.塔玛亚历山大藻和赤潮异弯藻的起始密度均为0.4×104cell/ml,接种比例为A∶H=1∶1;Ⅲ. 塔玛亚历山大藻的起始密度为0.8×104cell/ml,赤潮异弯藻的起始密度为0.2×104cell/ml,接种比例为A∶H=4∶1,每个处理组设4个平行样。 (3) 初始密度和接种比例 Ⅰ.塔玛亚历山大藻(简称A)的起始密度为0.2×104cell/ml,中肋骨条藻(简称S)的起始密度为0.8×104cell/ml,接种比例为A∶S=1∶4;Ⅱ.塔玛亚历山大藻和中肋骨条藻的起始密度均为0.4×104cell/ml,接种比例为A∶S=1∶1;Ⅲ.塔玛亚历山大藻的起始密度为0.8×104cell/ml,中肋骨条藻的起始密度为0.2×104cell/ml,接种比例为A∶S=4∶1,每个处理组设4个平行样。 1.4 ml培养液 培养液采用f/2营养盐配方,取指数生长期的微藻藻液接种在100ml培养液中。培养温度19±1℃,光照强度3000lx,光暗周期12h∶12h。用于微藻培养的250ml三角瓶预先用1mol/L的盐酸浸泡24h,灭菌海水冲洗干净后待用。 1.5 藻细胞密度测定 培养过程中定时摇动培养物,每隔4h摇动1次,每隔2d取1ml藻液,用Lugol碘液固定,血球计数板计数并计算细胞密度。每个样品计数3次,取其平均值。 2 结果 2.1 不同接种密度下藻细胞生长情况 在不同起始密度下,3种藻的生长曲线见图1、图2和图3。结果显示,无论是赤潮异弯藻、中肋骨条藻还是塔玛亚历山大藻,起始密度不同直接导致藻细胞的生长情况有所差异。比较三者生长情况,发现3种藻细胞的生长情况表现出类似的规律性。首先,随着接种密度的提高,3种藻细胞进入指数生长期的时间都相应地提前;其次,随着接种密度的提高,3种藻细胞进入静止期的时间同样都相应地提前;再者,随着接种密度的提高,3种藻细胞生长和繁殖所达到的最大细胞密度均相应地降低。 2.2 密度对赤潮异弯藻种群生长的影响 图4反映了混养条件下2种赤潮藻种群竞争生长的状况。在处理Ⅰ中,赤潮异弯藻从培养的第8天起进入指数生长期,在第22天时细胞密度