阿维菌素对黄芩和棘头虫急性毒性试验.docxVIP

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阿维菌素对黄芩和棘头虫急性毒性试验 黄鼠尾是中国早期发展迅速的著名鱼类。由于它是一种动物饲料,所以在人工饲养过程中,它主要以骨盆、蜗牛、蚌、鱼等昆虫卵为主的饲料。许多繁殖苗是野生苗,黄鼠尾的成株率很高。据研究报道,隐藏新棘虫在野生黄鳝肠道中的感染率为10.0%~63.6%,感染强度为1.75~8.50。隐藏新棘虫在黄鳝肠道内寄生,多悬挂于肠壁,引起病鳝肠壁损伤、发炎,或因大量寄生而引起肠梗阻、肠穿孔,对黄鳝生长及生存会产生不利的影响,必须在养殖过程中对棘头虫病进行防治。 阿维菌素(Avermectin),是一种高效、低毒、安全、抗虫谱广的新型驱虫药,其作用机理是通过干扰害虫神经生理活动,刺激虫体产生γ-氨基丁酸,从而阻断运动神经信息的传递过程,使害虫中央神经系统的信号不能被运动神经元接受,害虫在几小时内迅速麻痹、拒食、缓动或不动,24 h后即死亡。对绝大多数线虫、体外寄生虫及其他节肢动物都有很强的驱虫效果,内服对体内寄生虫有驱杀作用,外用时对体外寄生虫有较好的驱杀作用,不易产生抗药性。 在兽医临床上,阿维菌素已广泛用于马、牛、绵羊、山羊、猪、犬、骆驼、鹿等动物,作为防治各种线虫病以及驱杀体外寄生虫的药物。但阿维菌素对于防治黄鳝体内棘头虫的研究未见报道,本试验旨在研究阿维菌素对黄鳝及体内棘头虫的影响,以有效防治黄鳝棘头虫病。 1 材料和方法 1.1 阿维菌素g 试验鱼为野生的黄鳝,购自荆州农贸市场,体表无伤,规格一致,平均体长(25.0±1.5)cm,平均体重(20.0±3.8)g,试验前将黄鳝在室内暂养7 d,剔除受伤的个体。 棘头虫是从黄鳝肠道内解剖获得。 阿维菌素溶液为常州市武进得康技术有限公司生产,浓度10 g·L-1,为淡黄色溶液。 配制毒性试验母液用纯净水。黄鳝养殖试验用水为自来水,pH值7.2,充分曝气24 h以上,试验期间溶氧5.7~6.3 mg·L-1,水温16.0~21.5℃。棘头虫保存液为0.6%的生理盐水。 1.2 体外鞣虫致病性试验 试验于2008年4月20日至5月10日在长江大学黄鳝研究所室内进行,先根据药品规格配制母液,进行浓度测定,再按比例稀释成所需浓度。先经预备试验初步确定药物的致死浓度范围。然后按公式r=(b/a)1/n-1计算,设5个浓度梯度组和一个对照组(表1),每个试验组设置3个平行。 对黄鳝毒性试验采用常温静水试验法,每一浓度组受试黄鳝均为30尾。试验开始后的前8 h对受试黄鳝进行连续观察,然后定时检查,记录24、48、96 h黄鳝的活动、中毒症状及死亡等情况。试验期间每24 h更新试验液,及时剔除死亡个体,黄鳝的死亡以镊子夹起其口裂,身体完全不动,用大量清水冲洗,再放入清水仍不动为标准。 对棘头虫采用体外杀虫试验法。解剖黄鳝,将寄生有棘头虫的组织块剪下放入保存液中,然后再用解剖针轻轻取下虫体放入试验液中,试验期间每12h更新试验液,剔除死亡个体。每种浓度组受试棘头虫均为30条。试验开始后,在显微镜下连续观察虫体存活情况,记录虫体死亡时间。 黄鳝养殖试验容器为80 cm×50 cm×30 cm的塑料箱,体外杀虫试验用直径为10 cm的培养皿。 在试验开始后连续8 h观察各试验组受试物的情况,并记录试验物的异常行为。在24、48、72 h和96 h后记录受试物的情况,观察并记录受试物死亡数目。 对观察数据采用Karber法计算24、48及96 h的半致死浓度(LC50),安全浓度按96 h的LC50×0.1求得。 具体计算公式及步骤如下: LC50的95%可信限=lg-1(lg LC50±1.96×Sx50)(3)以上各式中,d为相邻两组剂量对数剂量之差;Xm为最大剂量对数;∑p为各剂量组死亡率之和;Sx50为lg LC50的标准误;q为各组剂量存活率,q=1-p;n为各组动物数。 2 结果与分析 2.1 预防麻黄的症状 不管试验液的浓度如何,用药后1 h左右受试黄鳝均表现出明显且相似的中毒症状:鱼头朝上并伸出水面,鱼体卷曲;最高浓度组中几乎所有黄鳝缠绕成一团;用手敲击盆沿,试验鱼惊恐不安,全身痉挛,身体颤抖尾卷曲。黄鳝临死前,鳃部肿大,肛门红肿,用镊子从尾部提起黄鳝,少数可从口内流出血水,解剖后,有的表现为肠壁和内脏充血。 棘头虫的中毒现象不是很明显,在显微镜下观察,用药5 h后受试棘头虫出现相似中毒症状:活动不活跃,身体蠕动明显缓慢,头部伸缩次数也减少了。棘头虫临死时身体由乳色变成白色,身体处于僵硬状态。 2.2 新生儿的感染 黄鳝放入阿维菌素药液1 h后,第5组的黄鳝明显不安,沿着容器壁剧烈狂游,将头露出水面,3 h开始失去知觉,用玻棒碰触黄鳝,反应迟钝。12 h后第5组的黄鳝出现死亡,几乎所有黄鳝缠绕成一团,用手敲击盆沿,试验鱼惊恐不安,全身痉挛,身体颤抖尾卷曲。黄鳝临死前,鳃

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