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全自动酶免疫分析仪法检测hiv抗体的影响因素分析 目前，hiv抗体筛查是一种基于自动酶免疫分析法的固相测量模式，采用微孔板条。在测量过程中，我们将涉及收集和储存样品、试剂准备、添加样品、加热和喂食、清洁板、显色、比例、结果评估、报告解读等。为了结果的准确, 本文对出现的假阳性和假阴性结果的影响因素进行了总结。 1 材料和方法 1.1 来自本地格式的资源 2006-2010年我区自愿咨询检测、羁押场所、性病艾滋病外展服务、哨点监测共计9 886人次。 1.2 仪器 ALISEI420705-全自动酶免疫分析仪 (意大利SEAC公司) 。 1.3 试剂 珠海-丽珠试剂有限公司提供的HIV-1/HIV-2型抗体检测试剂盒。 1.4 内部质量控制 临检中心提供HIV 阳性和弱阳性质控品 批号 200907003。 2 结果 全自动酶免疫分析仪检测HIV抗体影响因素见表1, 表2。 3 假阳性的检测 从表1看出标本重度溶血导致结果出现假阳性1例, 是因为血红蛋白中含有血红素基团, 其有类似过氧化物的活性。如血清标本中血红蛋白浓度较高, 则其就很容易在温育过程中吸附于固相, 从而与后面加入的HRP底物反应显色导致假阳性结果。还有报道称: (1) 待测样本要注意尽量避免细菌污染。 (2) 标本在2～8 ℃下保存时间过长, IgG可聚合成多聚体, 在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性。 (3) 分离血清不完全、血清中仍残留部分纤维蛋白原, 易造成假阳性。 (4) 标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中蛋白等分子产生破坏作用, 从而引起假阴性结果。 从表2中看出由于标本及试剂的加入引起假阳性2例, 可能的原因为: 此阳性标本位置紧邻阳性质控品, 而在用全自动酶免疫分析仪加样时因为钢针冲洗不净导致标本间的交叉污染。所以应使用一次性吸头, 避免反复使用钢针而出现假阳性结果, 在常规检测中表现为“拖带”现象。 由于洗板原因导致假阳性2例, 是因为洗液瓶内有絮状物沉淀, 洗液不干净, 导致细菌污染从而出现假阳性结果。此外, 在测定过程中温育及显色时间的准确把握可以避免弱阳性漏检 (有报道称:采用微波可提高温育效率或缩短温育时间) 。同时在比色时应选用双波长比色, 因为双波长双色是酶标仪在敏感波长450 nm和非敏感波长630 nm下各测定1次, 因此, 双波长比色测定具有能排除由微孔板本身、板孔内标本的非特异吸收、指纹、刮痕、灰尘等对特异显色测定吸光度的影响的优点, 可不设空白孔 (除非空白本身会产生颜色) 。 最后出具报告时, 要求对抗-HIV筛查结果有正确解释, 尤其是阳性和弱阳性反应的标本。因为某些自身免疫病亦会出现较多的假阳性结果。阴性结果也不能完全排除HIV感染的可能, 因为在艾滋病的窗口期抗-HIV抗体检测也可能成阴性。这就要求医学检验工作者对所做的测定项目除了知其然, 还要知其所以然。 综上所述, 随着我国艾滋病防控力度不断加大, 对于监测和检测技术的要求也不断提高, 艾滋病检测工作日趋增加。在现有基础上需进一步提高实验室检测的技术、掌握各环节影响因素, 尤以分析中的加样、温育、洗板为甚。