超声法提取山茱萸果核多酚工艺研究.docxVIP

? ? 超声法提取山茱萸果核多酚工艺研究 ? ? 李筱玲，邓寒霜，吴瑞宁 （商洛学院生物医药与食品工程学院，陕西商洛726000） 超声法提取山茱萸果核多酚工艺研究 李筱玲，邓寒霜，吴瑞宁 （商洛学院生物医药与食品工程学院，陕西商洛726000） 为优选山茱萸果核多酚的超声提取工艺，以提取率为指标，在单因素试验基础上采用正交试验法考察提取时的温度、处理时间、料液比以及提取所用乙醇的浓度等条件变化造成实验结果变化。结果表明，处理温度对实验结果影响最大，其次为处理时间、乙醇浓度，影响最小的是料液比；得到的最适提取条件为：以40%乙醇为提取溶剂，在料液比为1：25、温度50℃条件下超声提取40 min，重复提取2次，得山茱萸果核多酚的提取率为8.359%。 超声法；山茱萸果核；正交试验法；多酚 山茱萸为我国常用中药材，是山茱萸科植物。山茱萸（Cornus of ficinalis Sieb et Zucc.）的干燥果肉，具有补益肝肾、涩精敛汗等功效[1]。现代研究表明，山茱萸具有显著增强免疫功能，降血糖、抗氧化等作用[2-4]。山茱萸以果肉入药，产地加工要求去掉果核[5]。近年来有研究表明，山茱萸果核中化学成分与果肉相似，只是含量有所不同，甚至果核中多酚等活性成分含量要优于果肉[6-8]，因此有学者认为“山茱萸去核”的使用方式不恰当[9]。本研究对超声波法提取山茱萸果核中的多酚类成分的最适条件进行探讨，以期为山茱萸资源综合利用提供参考。 1 材料与方法 1.1 试验材料 山茱萸果核采自陕西省商洛市丹凤县棣花镇，经商洛学院李筱玲老师鉴定为山茱萸科植物山茱萸（Cornus of ficinalis Sieb et Zucc.）的果核。 1.2 试验方法 1.2.1 药材前处理 取山茱萸果核，去杂后于50℃烘干，粉碎，过20目筛，置干燥器中备用。 1.2.2 校准曲线制作 精密称取没食子酸标准品20 mg，用蒸馏水溶解并定容至100 mL，得浓度为0.2 mg·mL－1的标准品溶液。准确吸取标准品溶液0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 mL于10 mL容量瓶中，分别加入1 mL 10%的福林酚试剂，反应5 min后，加入4 mL 7.5%的碳酸钠溶液，充分混合后定容至10 mL，室温放置2 h，以没食子酸标准液为空白对照，在760 nm处测定吸光度值，绘制校准曲线[10-13]。 1.2.3 样品检测及提取率 精密吸取制备好的样品提取液1 mL于10 mL容量瓶中，加入1 mL 10%的福林酚试剂，混匀，放置5 min，再加入4 mL 7.5%的碳酸钠溶液，充分混合后定容至10 mL，室温下放置2 h，以没食子酸标准液为空白对照，在760 nm下测定吸光度值[10-13]，代入校准曲线方程中计算多酚浓度。 样品中总多酚提取率： 式中，W：多酚提取率（mg·g-1）；C：提取液中多酚浓度（mg·mL-1）；V：提取液体积（mL）；n：稀释倍数；m：山茱萸果核粉末质量（g）。 1.2.4 单因素试验 1）乙醇溶液对山茱萸果核多酚提取率的影响 精密称取山茱萸果核粉末适量，以20%、40%、60%、80%、100%的不同浓度乙醇溶液，按料液比1：10，在30℃下提取15 min，每个处理重复提取2次，得到多酚提取率。 2）料液比对山茱萸果核多酚提取率的影响 精密称取山茱萸果核粉末适量，按1：5，1：10，1：15，1：20，1：25料液比加入60%的乙醇溶液，在30℃下提取15 min，每个处理重复提取2次，得到多酚提取率。 3）处理温度对山茱萸果核多酚提取率的影响 精密称取山茱萸果核粉末适量，按1：15料液比加入60%的乙醇溶液，在30℃、45℃、60℃、75℃、95℃不同温度下提取15 min，每个处理重复提取2次，得到多酚提取率。 4）处理时间对山茱萸果核多酚提取率的影响 精密称取山茱萸果核粉末适量，按1：15料液比加入60%的乙醇溶液，在45℃分别提取5、15、25、35、50 min，每个处理重复提取2次，得到多酚提取率。 5）提取次数对山茱萸果核多酚提取率的影响 精密称取山茱萸果核粉末适量，按1：15料液比加入60%的乙醇溶液，在45℃分别提取35 min，分别提取1、2、3次，得到多酚提取率。 1.2.5 正交试验 依据单因素对山茱萸果核多酚的提取率的影响，选择影响较大的因素水平进行正交试验，以确定最适宜的山茱萸果核多酚超声提取工艺条件。正交试验设计见表1。 表1 正交试验因素水平设计 2 结果与分析 2.1 校准曲线 由图1可得，没食子酸校准曲线方程为：y=0.0926x－0.0138，R2=0.9994。 图1 没食子酸校准曲线 2.2 山茱萸果核多酚类提取率的单因素试验 2.2.1 乙醇溶液对山茱萸果核多酚提取