甾体激素类药物的
含量测定
ChP(2015)、USP、BP、JP均采用
RP-HPLC(大多内标法)
特点:用样量少,灵敏度高,分离效果好,测定速度快
(一)HPLC法
(二)UV法
△4-3-酮:240nm(±)
肾上腺皮质激素
雄性激素和蛋白同化激素
孕激素
苯环:280nm(±)
雌激素
(三)比色法
四氮唑比色法
异烟肼比色法
柯柏反应比色法
肾上腺皮质激素类
C17 -α-醇酮基
强还原性
四氮唑比色法
原理
双甲臜(暗蓝)
蓝四氮唑(BT)
ChP TTC(RT)
BP TTC(RT)
USP BT
操作方法(对照品法)
异烟肼比色法
甾体激素类药物C3-酮基及某些其他位置的酮基都能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合生成黄色异烟腙。
Kober反应比色法
柯柏(Kober)反应是指雌激素类药物与硫酸-乙醇共热,通过质子化、分子重排、去氢作用形成共轭多烯而显色。
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