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模拟酸雨胁迫对暴风雨菊叶片质膜透性和mda和叶绿素的影响
随着工业化和城市化的快速发展,酸雨已成为世界环境的中心问题。酸雨不但引起大气、土壤和水体酸化,也对城市生态系统产生了巨大影响。近20年来,我国酸雨的频度和强度不断增加,已成为继欧洲、北美之后世界第三大酸雨区。四川盆地因受其特殊的地理和气象条件及能源结构等因素影响,酸雨的形势非常严峻,而且还有日益增长的趋势,属中国酸雨频率最高的三个地区之一。酸雨对植物的伤害主要发生在叶片上,可导致植物叶片出现损伤,引起细胞超微结构破坏,造成膜脂过氧化加剧,影响植物的生长。赵栋等研究表明,轻度酸雨对茶梅无明显伤害,随着酸雨强度的增加植物受害程度明显增强。但也有研究表明,酸雨胁迫对植物体内的生理生化指标没有显著影响,或促进了植物的生长。
城市酸雨胁迫可能对城市园林植物生长发育产生不同程度的影响,已有研究主要集中在木本植物的形态发育、叶片保护酶系统和光合作用等生理方面,而酸雨对地被植物生理生态特性的影响研究相对较少。勋章菊(Gazania Hybrids)既可观叶也可观花,是既能地栽也可盆栽的新优地被植物,被广泛应用于城市园林绿化,但其生长发育是否受到酸雨胁迫的影响尚无研究报道。本研究以勋章菊为材料,采用盆栽控制试验,研究酸雨对勋章菊生理生态特性的影响,以期为城市绿化中地被植物的选择和抗酸雨研究提供依据和参考。
1 材料和方法
1.1 材料表面
试验于2011年3-8月在四川农业大学教学科研园区大棚内进行。供试植物勋章菊种子购于农友种苗(中国)有限公司成都分公司提供。
1.2 模拟酸雨喷液体系
勋章菊种子经常规浸种催芽后播种于盛有蛭石和珍珠岩混合基质(蛭石:珍珠岩=2∶1)的72孔穴盘中。待幼苗长成两片真叶时定植于高20cm,直径为15cm的花盆中,每盆3苗,生长期间保证正常供水,常规管理。
试验设4个处理,轻度酸雨(pH5.6)、中度酸雨(pH4.5)和重度酸雨(pH3.5和pH2.5),每个处理随机选择5盆健康植株。根据四川省酸性降水中的平均离子组成及通常模拟酸雨实验中所惯常采用的配比,按V(SO42-)∶V(NO3-)=5∶1 的比例配制母液,用去离子水稀释成pH 值分别为5.6、4.5、3.5和2.5的酸雨供试液,每个处理组喷洒一种pH值的模拟酸雨。于2011年7月中旬开始喷洒,采用喷雾器喷洒不同pH值的模拟酸雨,每5d喷1次,连续喷6次,每次均以叶片滴液为度。喷淋在16:00-18:00进行,每次喷洒酸雨时,用塑料薄膜覆在花盆上以防土壤酸化,不同梯度处理之间用塑料薄膜隔开。
1.3 叶绿素荧光指标的测定
2011年8月中旬选择植株中上部(从上往下第3~4片)生长一致的完全展开叶片,其中,每个植株分别采取2片叶,每个处理剪取30片叶剪碎后充分混匀,对各项生理指标进行3次重复测定,取其平均值。质膜相对透性采用电导法测定;丙二醛(MDA)含量的测定用硫代巴比妥酸法;叶绿素含量采用分光光度法;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 活性采用NBT法测定;过氧化氢酶(catalase,CAT) 活性的测定用高锰酸钾滴定法;过氧化物酶(peroxidase,POD) 活性测定采用愈创木酚法。
2011年8月中旬,用便携式调制叶绿素荧光仪(PAM-2100,Walz,德国) 测定叶绿素荧光各参数。测定时间为上午9 点到11 点,测量时选取植株中上部(从上往下第3片)完全展开叶的中部位置,用暗适应夹先对叶片黑暗处理20min后测定各项荧光指标。每个处理随机选5株,每株测1片叶,测定的主要参数包括: PSⅡ最大光化学效率(Fv /Fm)、PSⅡ的潜在活性(Fv /Fo)、PSⅡ实际光化学量子产量(ΦPSⅡ)、光化学淬灭系数(qP)和非光化学淬灭系数(qN)。
1.4 差异显著性检验
数据采用SPSS13.0软件的单因素方差分析(P0.05)进行差异显著性检验,以LSD 法进行多重比较;Pearson进行相关分析;采用Excel软件绘制相关图表。
2 结果与分析
2.1 酸雨处理对扩大进一步提高海域mda的影响
从图1A可以看出,随着酸雨pH值的降低勋章菊叶片质膜透性显著增加,中度酸雨(pH4.5)处理与轻度酸雨(pH5.6)处理差异不显著,重度酸雨(pH3.5和pH2.5)处理与pH5.6处理差异显著,分别增加了29.1%和34.7%,但pH3.5和pH2.5处理间差异不显著,表明酸雨对勋章菊叶片细胞膜造成了伤害,并且随着酸雨强度的增加膜损伤程度逐渐加重,当损伤达到一定程度后细胞膜受到严重伤害。
MDA是膜脂过氧化的产物,MDA含量的变化常被用于反映植物在逆境下的受伤害程度。从图 1B可以看出,中度酸雨(pH4.5)处理勋章菊叶片MDA含量较轻度酸雨(pH5.6)有所增加
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