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青蒿素抗心律失常作用研究 抗癫痫药物是青艾从提取的一种化学品中提取的，具有抗癫痫作用。该药对心血管方面的作用尚未见报道,在应用其治疗疟疾的同时,发现该药可使窦性心动过速消失。为了拓宽该药的临床应用,本实验研究了其抗心律失常作用及机制。 1 波米注射液生产 青蒿素由沈阳药科大学提供纯度以上盐酸维拉帕米注射液,江苏省连云港制药厂生产,批号:960530;盐酸利多卡因注射液,江苏省泰兴市制药厂生产,批号:9606202。 2 方法和结果 2.1 尾静脉给药剂量 Wistar大鼠50只,体重(230±10)g,♀♂各半,随机分为对照组(生理盐水),青蒿素小(50 mg·kg-1)、中(100 mg·kg-1)、大(200 mg·kg-1)剂量组和维拉帕米(10 mg·kg-1)组。对照组及青蒿素组每天灌胃给药1次,连续3 d,末次给药后30 min,以乌拉坦1.2 mg·kg-1腹腔麻醉,冠脉结扎,记录Ⅱ导联心电图。阳性对照在冠脉结扎前5 min,即尾静脉给药。青蒿素各用药组可明显推迟大鼠冠脉结扎后室性早搏出现时间,与对照组比较有明显差异(P0.01),结果见表1。 2.2 青蒿素对cacl2诱导室性心动过速vt及心肌纤颤vf的影响 Wistar大鼠50只,体重(230±10)g,♀♂兼用,其分组、给药剂量及给药方法均同前。末次给药后60 min,以乌拉坦1.2 mg·kg-1腹腔麻醉,记录Ⅱ导联心电图。对照组及青蒿素组即刻尾静脉注射100 g·L-1CaCl2130 mg·kg-1。阳性对照药组先尾静脉注射维拉帕米10 mg·kg-1;3 min后再尾静脉注射100 g·L-1CaCl2130 mg·kg-1。实验结果经χ2检验,青蒿素各用药组可明显对抗CaCl2诱发的室性心动过速(VT)及心室纤颤(VF)发生的例数,与对照组比较差异有显著性(P0.05)。结果见表2。 2.3 监区主刑室颤发生时间 选体重(20±2.0)g室颤阳性的昆明种小鼠50只,♀♂兼用,随机分5组,分别灌胃给予青蒿素小剂量70 mg·kg-1,中剂量140 mg·kg-1,高剂量280 mg·kg-1,对照组等体积生理盐水,每天1次,连续3次。阳性对照药利多卡因10 mg·kg-1,尾静脉给药1次。末次药后60 min,逐一将小鼠放入内含氯仿棉球的500 ml倒置烧杯内。观察至呼吸完全停止时,立即取出,四肢插入针状电极,记录Ⅱ导联心电图,记录室颤发生时间,阳性对照组在放入前尾静脉注射利多卡因,5 min后再放入烧杯内(每换一只小鼠前,烧杯内棉球滴加1 ml氯仿)。实验结果表明,青蒿素各用药组能明显对抗氯仿诱发的心室纤颤,与对照组相比差异有显著性(P0.05,P0.01),其统计结果列于表3。 2.4 不同电极的电流变化规律 IK1)的影响豚鼠体重(280±20)g,按文献描述的方法分离单细胞,将分离好的单细胞置于浴槽中,用台氏液1 ml·min-1恒速灌流。实验过程由计算机软件pclamp 6.02(Axon Instrument,美国)控制,通过放大器(Axon Instrument)及A/D,D/A转换控制刺激的发放、信号采集和数据分析。当电极和细胞形成高阻封接,调节刺激参数,保持电位固定于-40mV,在-120 mV至+60 mV之间,每隔10 mV连续去极化19次,脉冲保持时间为300 ms。实验结果表明,此电流随电压的变化曲线(I-U曲线)表现为“N”型。青蒿素5μmol·L-1给药5 min对IK1即有抑制作用,10μmol·L-1可抑制IK149.8%,30μmol·L-1可抑制IK168.7%。由此可见,青蒿素对IK1的抑制作用呈剂量依赖性。青蒿素对电流的作用及I-U曲线如图1,2所示。 3 青蒿素的用量 实验证明,青蒿素具有明显的抗心律失常作用,能显著对抗实验性心律失常发生的时间,降低室颤发生率。各实验组与对照组相比均有统计学意义(P0.05,P0.01)。但剂量过大,其抗心律失常作用不再增加。 膜片钳实验表明,青蒿素可明显抑制内向整流钾电流,并且呈剂量依赖性。IK1对于维持静息膜电位和心肌动作电位复极起重要作用,同时该药对IK亦呈剂量依赖性抑制作用,对IK1,IK的抑制作用是该药降低自律性,延长动作电位时程的离子基础,是该药抗心律失常作用的主要机制。