丹参红花提取物有效部位对心肌缺血再灌注大鼠xb.docxVIP

丹参红花提取物有效部位对心肌缺血再灌注大鼠xb 有效恢复缺血心肌的再注射是治疗心肌缺血的根本途径。但恢复正常的血流灌注, 缺血区的损伤反而加重, 并引发缺血/再灌注损伤 (ischemia/reperfusion injury, IRI) 。目前, 广泛开展的再灌注虽然可使缺血心肌组织、功能及时恢复, 损伤结构得以修复, 但再灌注后也可加重心肌组织功能障碍及代谢、电生理方面的进一步损伤, 甚至发生不可逆的改变。因此, 如何保证梗死相关血管得以再通的同时使心肌组织细胞的损伤减轻是再灌注面临的又一课题。 丹参主要水溶性组分丹酚酸 (salvianoic acid) 化合物是丹参水提物中主要成分, 被证明为治疗心血管疾病的主要药效物质基础, 其中含量最高的两个成分丹酚酸A (SalA) 和丹酚酸B (SalB) 活性最强, 具有抗氧化、抗凝、抗血栓等药理作用。红花中的主要水溶性组分红花黄色素 (safflor yellow, SY) 存在于红花的水溶性提取部位, 被认为是红花的主要效应物质, 近年来发现在SY中羟基红花黄色素A (hydroxysafflor yellow A, HSYA) 含量较高, 是发挥药理作用的有效单体成分。丹参红花有效部位配伍组成的注射液 (丹红注射液) , 具有改善心肌缺血, 抑制血栓形成的作用。临床研究表明对冠心病患者有较好的疗效, 本研究将丹参红花提取物有效部位水溶性组分中的主要物质丹酚酸B和羟基红花黄色素A进一步提高其在药物中的含量, 称其为丹参红花有效部位注射液, 观察其对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。 1 材料和方法 1.1 细胞南果梨酒scxk Srague-Dawley (SD) 种大鼠60只, 清洁级 (VAF) , 体重180～200 g, 雌雄各半, 许可证号:SCXK (京) 2007-0001;由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。清洁级动物房饲养, 定时给予全价营养饲料喂食, 室温22～25 ℃, 湿度50%～70%。 1.2 步长制药有限公司 丹红注射液 (10 mL/支;原儿茶醛0.05 mg·mL-1, 相当于生药1 g·mL-1) , 由山东济南步长制药有限公司生产, 批号:060904;丹参红花有效部位注射液 (丹酚酸B含量10.44 mg·mL-1, 羟基红花黄色素A含量22.1 mg·mL-1, 相当于生药24.3 g·mL-1) 溶剂为生理盐水, 批号:070625, 由中国科学院大连化学物理研究所提供。 1.3 免疫试剂盒 肌钙蛋白T (cTnT) 试剂盒由美国Rapid Bio Lab公司生产, 北京莱博特利生物医学科技公司提供, 批号肌酸激酶同工酶 (CK-MB) 试剂盒由北京中生北控生物科技股份有限公司提供, 批号:070181;血栓素 (TXB2) 和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α) 放射免疫试剂盒, 由北京普尔伟业生物技术有限公司提供, 批号二磷酸腺苷 (Adenosine diphosphate ADP) , 浓度:0.2 mmol·L-1, 由美国 CHRONO-LOG公司生产, 北京现代威士达医疗器械有限公司提供, 批号:3368。 1.4 上海sc-3型设备厂 心电图机, 型号:ECG-6511, 上海光电仪器有限公司生产;人工呼吸机, 型号:SC-3, 上海医疗设备厂;全自动生化仪, 型号: RX-2000型, 美国TECHNICON公司生产;血小板聚集仪, 型号:LBY-NJ2型, 北京普利生公司生产;放射免疫R计数仪, 型号:SN-682, 上海核辐射仪器有限公司生产。 2 实验方法 2.1 冠状动脉检查 20%氨基甲基乙酯 (乌拉坦) 腹腔注射麻醉 (0.7 mL·kg-1) , 大鼠固定在木板上。气管插管, 人工呼吸 (潮气量为2 mL·100 g-1, 呼吸频率为50次·min-1) 吸入室内空气, 开胸, 剪开心包膜, 轻轻挤压大鼠胸腔右侧壁, 将心脏挤出。在左心耳下缘, 肺动脉圆锥左缘与左心耳之间进针, 以冠状静脉主干为标志, 左心耳下方2～3 mm处, 用丝线结扎冠状动脉左前降支造成大鼠心肌缺血, 多功能心电监护仪监护, 显示结扎冠状动脉成功后10 min经股静脉注射给药。假手术组只穿线不结扎, 注射等剂量的生理盐水;模型组结扎后, 给予等剂量生理盐水。 2.2 各组小鼠血清txb2,6-keto-pgf1水平 实验分6组, 每组10只大鼠, 分别为假手术组:只穿线不结扎, 注射等量生理盐水;模型组:注射等剂量生理盐水;阳性对照组:丹红注射液上市产品 (以原儿茶醛含量计算0.05 mg·mL-1) , 1.80 mL·kg-1(体重, 相当于1.80生药g·kg-