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海水养殖鱼类磺胺类抗生素残留测定及健康风险评价 中国是世界上唯一一家以水为主食性统计量比育种规模更高的国家。这种大规模、高密度和网络化的饲养模式给动物带来了疾病，提高了饲料利用率，促进了动物的生长。由于生产和使用中缺乏一般的指导意义和限制，导致抗生素滥用和非法使用。另一方面，它会对水生态环境产生污染，另一方面，水中的药物残余会通过食物链传输，这会威胁人类的健康[3.5]。 磺胺类药物 (sulfonamides, SAs) 是一类具有抗菌谱广、疗效强、方便安全、价格低廉等优点的抗生素, 在畜牧和水产养殖中广泛应用.联合国法典委员会 (CAC) 、欧盟和美国等对食品和饲料中磺胺类药物的总限量为不得超过0.1 mg·kg-1.抗生素进入动物体内后有40%~90%会以母体或代谢物的形式随尿液和粪便排出体外进入环境.SAs进入环境会造成水体和土壤污染, 被植物吸收蓄积[10~12], 通过摄食进入人体后的SAs能破坏人的造血系统而造成溶血性贫血症, 磺胺二甲嘧啶等也存在潜在致癌性.我国环境中磺胺类药物的污染情况严重.李彦文等在珠三角地区蔬菜基地土壤中检出磺胺类药物的含量范围为33.3~321.4μg·kg-1, Luo等检测到磺胺类药物在海河中的含量高达385 ng·L-1, 叶赛等发现渤海水域受磺胺类药物污染.国内多个城市的地表水和沉积物中也能检测到磺胺类药物的残留[18~20].磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶和磺胺甲基异唑是磺胺类抗生素的典型代表. 广东沿海地区河流纵横, 池塘, 水库广泛分布, 水产养殖业发达.由于地理环境和饮食习惯的影响, 水产品是当地居民膳食的重要组成部分之一.因此水产养殖环境中抗生素的残留及其健康风险评价值得关注.目前国内外对抗生素残留的研究有许多是关于分析检测方法建立[21~23]和药代动力学方面的报道, 在广东沿海地区环境样品中抗生素的残留也有相关研究报告[25~28].但目前关于该地区养殖鱼类中抗生素残留特征和食品安全评价的研究还很少.本研究调查了广东沿海两个典型海水养殖区中3种磺胺类抗生素在水体环境以及养殖鱼类中的含量状况, 初步评估食用海水养殖鱼类摄入磺胺类抗生素对人体的健康风险, 以期为抗生素的安全使用提供基础依据. 1 材料和方法 1.1 养殖区见表3 样品分别采自广东沿海地区两个重要的海水养殖区:大亚湾某海水养殖区和阳江某海水养殖区 (见图1) , 大亚湾养殖区采样点包括S0:对照区 (远离养殖区约3 km处对开海面) 、S1:鱼排养殖区、S2:牡蛎养殖区、S3:珍珠贝养殖区;阳江养殖区采样点包括S4、S5、S6为均为不同的鱼排养殖区.采样样品包括沉积物, 深度为0~10 cm及篮子鱼、美国红鱼、红鳍笛鲷、黄鳍鲷、黑鲷、紫红笛鲷和卵形鲳鲹这7种鱼类样品, 样品信息见表1. 使用彼得逊采泥器采集沉积物至少200 g, 用锡纸包好装进封口袋;同时采集大小相近养殖鱼类, 每种3条, 测定体重和体长后马上解剖, 背部肌肉和肝脏用锡纸包好置于冰壶冷藏.样品在当天运回实验室后, 放入-20℃冰箱保存. 1.2 超声波清洗器设备 Aglient 1100型高效液相色谱仪 (带紫外检测器, 配自动进样器) ;德国MARTIN CHRIST公司冷冻干燥器;美国Organomation N-EVAPTM111型氮吹装置;Eppendorf 5804高速冷冻离心机;3510E-DTH超声波清洗器;Thermo Orion 3 Star精密p H计;国产金坛匀浆机. 3种磺胺类抗生素分别为磺胺嘧啶 (SDZ) 、磺胺二甲嘧啶 (SM2) 、磺胺甲基异唑 (SMX) .标准品均产自Sigma公司, 纯度98%.乙腈为色谱纯 (Sigma公司) , 其他化学试剂均为国产分析纯, 实验用水为暨南大学附属医院制药厂专用四蒸水. 标准母液的配制:精确称取3种磺胺药物各10.0 mg, 0.1%盐酸预溶并配成3种药物浓度均为10μg·m L-1的混合溶液, 在4℃冰箱保存, 使用期为3个月.混合标准工作液配制:用流动相 (V0.1%甲酸∶V乙腈=78∶22) 稀释为10、20、50、100、200、500和1 000 ng·m L-1的浓度梯度, 使用期为1个月. 1.3 离心提取方法 将鱼肉捣碎后, 精密称取5.0 g样品, 放入30m L匀浆杯中, 加乙腈10 m L和10 g无水硫酸钠, 10 000 r·min-1匀浆1 min, 匀浆液转入50 m L离心管中, 用10 m L乙腈清洗刀头及匀浆杯, 转入离心管, 混匀, 中速振荡5 min, 12 000 r·min-15℃低温离心10 min, 倾取上清液, 先用氮气吹干至10 m L再分别用10 m L正己烷萃取两次, 弃上层.氮气吹干, 加入1.0 m L流动相溶解