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北京市污水处理厂中常用的4种病毒指示生物 可能存在的城市废水中的病毒（主要是肠道病毒）对人类健康的风险越来越重视。直接检测病毒本身的操作复杂且安全隐患。因此，有必要找到合适的病毒指示生物。美国epa提出了用肠球菌作为病毒指标的建议生物。作为水中病毒的潜在警告，它可以用作废水处理和再生利用过程中的病毒安全性评估，阐明病毒的遗传因子机制等领域的研究。用于水质评价的实验动物包括sc分数（水生生殖器）、f-糖菌（f-糖菌体）和kalma粉菌体。sc分数是由细胞膜感染的一种由肠球菌主导的dna病毒。它被认为是反映水中纳毒量和肠道病毒的良好指示生物。f-钠毒粉菌体是一种由病毒毛感染的雄性肠菌病，与水体中毒粉菌体和粪便中毒含量稳定的对应关系。这是理想的水肠病毒的指示生物。在本研究中，测定了北京三个污水处理厂的单位数、唾液、水处理、细菌和粪便中毒的浓度，分析了水处理中侵蚀性和细菌的消除效果，预测了水中肠道病毒的存在水平。 1 材料和方法 1.1 鼠伤寒沙门氏菌 大肠埃希氏菌(Escherichia coli)CN(也称为WG5)和鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)WG49,作为噬菌体宿主菌,来自ATCC. 1.2 培养基的制备 MSB培养基:胰蛋白胨 10 g,酵母提取物 3 g,牛肉膏12g,NaCl 3g,Na2CO3750mg,MgCl20.6g,CaCl2876mg,蒸馏水 1 000 mL,pH值7.2.MSA培养基为MSB培养基中加入18 g 琼脂粉,ssMSA为MSB培养基中加入9 g 琼脂粉. TYGB培养基:胰蛋白胨 10 g,酵母提取物 1 g,NaCl 8 g,CaCl2300 mg,葡萄糖 1 g,蒸馏水 1 000 mL,pH值7.2.TYGA培养基为TYGB培养基中加入18 g 琼脂粉,ssTYGA为TYGA培养基中加入9 g 琼脂粉.M-TEC培养基:示蛋白胨5 g,酵母膏 3 g,乳糖 10 g,K2HPO43.3 g,KH2PO41 g,NaCl 7.5 g,十二烷基磺酸钠 0.2 g,脱氧胆酸钠 0.1 g,溴甲酚紫80 mg,溴酚红 80 mg,琼脂粉 15 g,H2O 1 000 mL, pH7.3.蛋白胨-盐溶液:蛋白胨 1 g,NaCl 8.5 g,蒸馏水 1 000 mL. 1.3 sc噬菌体宿主菌株的培养和形成 采用传统的双层琼脂平板法.SC噬菌体和F-RNA噬菌体的检测参照国际标准方法(ISO10705-2和ISO10705-1).以E.coliCN作为SC噬菌体宿主菌,用MSA铺下层平板,上层采用ssMSA.以S.typhimuriumWG49作为F-RNA噬菌体的宿主菌,TYGA铺下层平板,上层采用ssTYGA.水样用蛋白胨-盐做梯度稀释或不稀释.接种后的平板在(36±2)℃ 培养4～12h后,计每板上的噬菌斑数.噬菌体浓度用单位体积水样的噬菌斑形成单位(PFU)表示. 1.4 菌落单位cfu 采用M-TEC培养基,铺平板的方法测定,在平板中加入1mL梯度稀释水样,加入10mL左右的培养基,45℃培养24h后,计黄色菌落数,用单位体积水样的菌落形成单位(CFU)表示. 2 砂滤和砂滤处的工艺 水样取自北京市3座城市污水处理厂A、B、C的各处理单元.A厂为典型的活性污泥工艺,B厂为氧化沟工艺,C厂为A2O工艺,各污水厂都有深度处理工艺,包括絮凝沉淀、加氯消毒和砂滤,其中C厂没有砂滤工艺.各厂的工艺流程如图1.A厂的取水位点为:进水(A-1),曝气沉砂池进水(A-2),曝气沉砂池出水(A-3),初沉池出水(A-4),二沉池出水(A-5),絮凝沉淀池出水(A-6)和总出水(A-7).B厂的取水位点为进水(B-1),曝气沉砂池进水(B-2),曝气沉砂池出水(B-3),二沉池出水(B-4),絮凝沉淀池出水(B-5),加氯间出水(B-6),总出水(B-7)和污泥脱水滤液.C厂的取水位点为进水(C-1),初沉池出水(C-2),二沉池出水(C-3),絮凝沉淀池出水(C-4) 3 结果与讨论 3.1 污水厂对sc噬菌体的总去除率 分别测定A、B、C 3个污水处理厂进、出水中的噬菌体及A厂的粪大肠菌浓度,A厂进水中粪大肠菌浓度约为1.67×104PFU·mL-1.A、B、C 3个污水处理厂进水中SC噬菌体浓度范围为6.25×103～1.34×104PFU·mL-1,F-RNA噬菌体为2.4×10～2.4×103PFU·mL-1,说明噬菌体在污水中普遍存在且浓度较高,其中SC噬菌体浓度高于F-RNA噬菌体,与文献报道相同. A、B、C 3个污水处理厂对2类噬菌体的总去除率见表1.SC噬菌体及F-RNA噬菌体的平均总去除率分别为72.45%～99.89%和57.84%～93.06%,