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氯化机消毒副产物最低有效剂量的探索 在当前污染严重的情况下，额外氯消毒是确保生物安全的主要途径，但氯消毒副产品的数量仍在增加。动物实验研究发现三卤甲烷(trihalomethares, THMs)具有致癌性和致突变性,流行病学调查显示,饮用氯化消毒后的水,癌症发病率明显增加。寻找消毒的最低有效剂量与替代氯化消毒的研究日益重要起来。ClO2是WHO确认的AI级高效、广谱、安全的杀菌消毒剂,也是国际社会公认的氯系列消毒剂最理想的换代产品。研究表明ClO2及其副产物也对动物的血液、生殖发育等方面产生一定的生物学负效应,国际癌症研究所也将亚氯酸盐列为致癌物。但有研究表明低剂量ClO2对人体不会产生有害影响。许多研究证明将ClO2、Cl2联合使用,ClO2用以替代Cl2进行预氧化处理,并可减少Cl2的使用量及有机消毒副产物的生成量;Cl2的存在可以抑制ClO-2、ClO-3的生成。二者的联合作用既起到消毒的协同作用,又能减少各自消毒副产物的产量,从而取得满意的消毒效果。 本试验采用不同剂量ClO2、NaClO、ClO2+NaClO等方式进行消毒试验,对水中大肠杆菌的杀灭率、ClO2剩余量、总余氯、ClO-2生成量等指标进行检测,从而确定ClO2、NaClO及其联合作用的最低有效剂量,并探索消毒副产物生成量最低时的消毒最低有效剂量。 1 材料和方法 1.1 氧化氯发生装置 超净工作台、恒温培养箱、SM702电位滴定仪(瑞士万通公司)、SHZ-Ⅲ型循环水真空泵、便携式含氯消毒液发生器(北京科大科技园科技发展有限公司)、二氧化氯发生装置、Φ65mm滤器等。 1.2 蘑菇 大肠杆菌8099(Escherichia coli)(由湖北省疾病预防控制中心提供)。 1.3 主试剂 氯化钠、亚氯酸钠、腐植酸、氧化苯胂、碘化钾、硫代硫酸钠、吐温80、品红亚硫酸钠培养基等,均为分析纯或优级纯。 1.4 细胞培养 无菌操作下,挑取大肠杆菌一环于普通琼脂斜面上做S型划线,37℃恒温培养箱内培养16~18h,用6ml PBS冲洗斜面,电动混合器上混匀20s。 1.5 消毒液的制备 1.5.1 盐藻acol有效氯测定 称取10.0g NaCl溶解于500ml蒸馏水中,将NaCl溶液置于便携式含氯消毒液发生器中发生NaClO消毒液,发生完毕后用碘量法测定其有效氯在1500~2000mg/L左右,NaClO消毒模拟水样的剂量以有效氯计。 1.5.2 o2消毒液制备 参照《饮用水二氧化氯净化技术》中ClO2消毒液制备方法进行。发生完毕,碘量法测定其含自由氯250mg/L左右,ClO2消毒模拟水样的剂量以自由氯计。 1.6 试验菌污染水样的配制 根据卫生部《消毒技术规范》生活饮用水消毒效果鉴定,试验菌污染水样的配制要求进行。单蒸水灭菌后加入无菌的腐植酸溶液和大肠杆菌菌悬液,使水样色度为30度且水中含菌量达5.0×105~5.0×106cfu/L。 1.7 消毒方法 1.7.1 消毒cl2 在100ml模拟水样中加入不同剂量ClO2消毒液,摇匀,静置60min。 1.7.2 消毒naclo 在100ml模拟水样中加入不同剂量NaClO消毒液,摇匀,静置60min。 1.7.3 消毒消毒钠消毒 在100ml模拟水样中先加入不同剂量ClO2消毒液,摇匀,静置30min后, 再加入不同剂量NaClO消毒液,摇匀,静置60min。 1.7.4 有效氯的计算 中和剂的投加量按“0.141mol/L NaS2O31.0ml可中和1mg的有效氯”计算。 分别以不同剂量ClO2、NaClO、ClO2+NaClO对模拟水样进行的消毒试验至少重复3次,试验结果均在试验重复3次之后得出,由于试验结果的重复性较好,故试验结果均为最理想的3次试验结果的均数。 1.8 模拟样品的制备 根据卫生部《消毒技术规范》生活饮用水消毒效果鉴定,活菌的培养计数要求进行。分别将消毒与未消毒的模拟水样抽滤,作为试验组与阳性对照组,滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上,取同批次未处理的培养基作为阴性对照,均做3个平行对照。培养基置于37℃恒温培养箱中培养24h。如阳性对照在5.0×105~5.0×106cfu/L的范围内,阴性对照无生长,该试验的结果有意义。 1.9 二氧化氯残留、亚氯酸根clo-2和总氯含量的测定 采用电位滴定法Ⅱ,主要参照文献进行。 1.10 统计方法 利用SPSS软件进行方差分析。 2 结果与讨论 2.1 大肠杆菌自然消极影响 模拟水样配制并分别放置0h和1.5h后,水样中的大肠杆菌含量分别为4.47×106cfu/L和4.74×106cfu/L。可以认为,在1.5h之内,模拟水样中的大肠杆菌无明显自然消亡现象;在模拟水样的消毒试验中,大肠杆菌数量的减少可被完全归结为消毒剂作用的结果。 2.2 clo及