干花豆叶挥发油成分的气相色谱-质谱联用分析.docxVIP

干花豆叶挥发油成分的气相色谱-质谱联用分析 干花豆又名水罗伞，是科豆科夫科的一种蝴蝶科。它分布在广西桂南。这是一种传统的西方药物。它具有辛、平、甜、微酸、无权等特点。具有安神、活血、止痛、止痛、润肺化痰等功效。主要用于治疗中风瘫痪、儿童精神障碍和青少年疾病。同时，它对治疗中风瘫痪、儿童肥瘤、产后及病后虚弱、母体复元、跌倒和疼痛、骨折、风关节疼痛等疾病效果明显。药理研究表明,其提取液可以提高小鼠的短时性和长时性记忆保存率;学龄前儿童服用其提取液半年至1年后,智商有不同程度的提高。干花豆叶挥发油化学成分未见文献报道。本文通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)鉴定干花豆叶挥发油成分,为进一步开发利用干花豆叶及筛选其活性成分提供参考。 1 实验部分 1.1 干花豆的制备 干花豆新鲜叶2011年5月采自广西植物研究所植物园,经广西植物研究所分类室鉴定为干花豆的叶子,凭证标本保存于广西植物研究所标本馆(GXIB);所用的无水乙醚、无水硫酸钠均为分析纯级;所用仪器有7890A/5975C型GC-MS联用仪(美国Agilent公司生产)和R-114型旋转蒸发仪(瑞士Buchi公司生产)。 1.2 实验方法 1.2.1 挥发油的提取 称取新鲜干花豆叶1 kg,切碎,用水蒸气蒸馏法提取挥发油,向蒸出液加入无水乙醚进行萃取,向萃取液加入无水硫酸钠进行干燥后,用旋转蒸发仪减压回收挥发油,然后加入适量正己烷溶解,再用0.45 μm微孔滤膜过滤,取滤液用于GC-MS分析。 1.2.2 升温程序 GC条件:色谱柱为HP-5MS 5% Phenyl-Methyl Siloxane (30 m ×0.25 mm× 0.25 μm) 弹性石英毛细管柱。升温程序:起始柱温70 ℃,保持3 min后,以 1 ℃/min 速率升到100 ℃,然后以2 ℃ /min 速率升到180 ℃;汽化室温度250 ℃;FID检测器温度280℃,载气是体积分数为99.999%的高纯氦气;载气流量:3 ml/min;进样量1.0μl,分流进样,分流比为30∶1。 MS条件:电离方式EI;电子能量 70 eV;传输线温度 250℃;离子源温度230 ℃;四极杆温度150 ℃;质量范围35～450aum。 1.2.3 质谱图的检索 取1.0μl挥发油的正己烷溶液,采用GC-MS分析,所得的质谱图通过Agilent Chemstation化学工作站NIST05a.L质谱数据库检索,并与标准谱图对照,鉴定各组分。采用峰面积归一化法计算各化学成分在挥发油中的相对含量。 2 挥发油化学成分 从1kg新鲜干花豆中提取到2ml淡黄色、具有特殊浓郁气味、透明的油状液体,鲜叶中挥发油含量为0.16%。进行 GC-MS测试,测得干花豆叶中挥发油的总离子流(图1)。从挥发油中分离出28个组分,确认了其中的22种成分,占挥发油总量的92.19%。分析结果表明,干花豆叶挥发油的主要化学成分有:4-乙烯基愈创木酚(22.4%)、甘菊烷烃(16.1%)、2-甲基-6-羟基喹啉(8.1%)、2,5,5,8a-四甲基-3,4,4a,5,6,8a-四氢-2H-1-苯并吡喃(7.5 %)、3,4二甲氧基苯乙烯(3.3%)、杜烯(3.2%)、香橙烯(3.2%)(表1)。经过文献检索发现,所得到的22种成分均为首次从干花豆叶中鉴定出来。 3 发酵香辛料 通过毛细管气相色谱和气相色谱-质谱分析,首次鉴定干花豆叶挥发油中的22种成分,占挥发油总量的92.19%。挥发油中最主要成分4-乙烯基愈创木酚(又名4-乙烯基-2-甲氧基-苯酚),是无色或淡黄色油状液体,具有发酵香气并略带甜味,微带酚的气息,是决定酒类、茶叶、咖啡、酱油等的品位及质量的香味的主要成分之一,同时还是用于医药、合成日用品、香精等的不可多得的高档香料之一,是国酒茅台的香味的主要成分之一,其天然品主要存在于酒类发酵物的挥发物中;挥发油中的另一个主要成分甘菊烷烃,是化妆品中重要的香味物质,具有抗炎、抗过敏及杀菌的作用,对皮肤的保湿及增加皮肤细胞的活性具有较好功效。