心脏细胞离子通道的结构与功能.docxVIP

心脏细胞离子通道的结构与功能 从生物物理的角度来看，离子通道应具有三个最重要的性质：渗透性、选择性和门控制机制。离子通道是以该通道允许通透的主要离子命名的, 门控机制则调节着该离子的流动过程。细胞膜离子通道根据其门控机制可以分为三类:电压门控性通道、配体门控性通道以及机械敏感性通道。另外, 还有细胞器离子通道和细胞间离子通道。 膜片钳技术与分子克隆、基因突变技术相结合, 已成为一种非常有力的研究手段, 从分子水平解释离子通道的孔道特性、动力学过程、结构和功能的关系以及功能的调节。本文将系统介绍心脏细胞离子通道的研究进展;根据各种离子通道的特性解释动作电位的形成过程;并阐述离子通道功能状态与心律失常发生的关系。 1 独子带的结构与功能关系 1.1 na+、ca2+通道的亚基 细胞膜电压门控性离子通道是由一组关系密切的基因组所控制, 因此表现出许多共同的结构特征。离子通道是由糖蛋白构成的多亚基复合物, 包括α亚基和多种其它亚基。单独表达α亚基即可完成通道的功能, 而其它亚基则有助于维持正常的通道动力学和电压依赖性。Na+、Ca2+通道的α亚基有四个同源的结构域 (homologous domains, D1～D4) , 每一结构域由六个呈α螺旋状的跨膜部分 (segment, S1～S6) 构成。其间有肽链连接。四个结构域排列呈四边形, 中间为亲水性离子孔道。电压依赖性K+通道的α亚基分子较小, 一个α亚基相当于Na+或Ca2+通道的一个结构域, 因此一个功能性K通道是由四个α亚基共同构成 (见图1) 。 (1) 孔道的氨基酸组成 多种毒素、药物、无机阳离子都可选择性阻断电压门控性离子通道。生物物理研究发现其作用机制是这些物质分子可进入孔道, 与通道选择性通透的离子竞争性的结合在孔道部位。因此, 通道阻断剂可作为分子标记物和特异性探针, 确定孔道的氨基酸组成。 通过对克隆的电压门控离子通道研究发现, S5～S6跨膜螺旋之间的肽链深入到细胞膜中, 为通道最狭窄的部分, 形成孔道区 (pore region) , 是决定通道通透性的重要区域。此外, 螺旋S6也可影响离子通透性, 参与孔道的形成。 孔道具有选择性滤器功能。Na+通道只对Na+高度选择, 若替换孔道区的带电荷氨基酸或疏水氨基酸, 则明显地改变了通道的选择性。 (2) 螺旋带正电荷的氨基酸 近年来发现螺旋S4为Na+、K+、Ca2+通道的电压感受器。它们的结构非常相似。在α螺旋结构中, 每两个氨基酸之间都有一个带正电荷的氨基酸。细胞膜在去极化过程中, 这些带正电荷的氨基酸向细胞外移动, 产生一短暂的外向门控电流, 随之通道开放。 (3) 抗心肌细胞na+通道功能的改善 由于不同离子通道的特点, 失活门控机制也不同。 “球和链”理论 (ball and chain) 来解释瞬间外向K+通道失活机制。采用克隆的shaker K+通道研究发现α亚基N端构成“球和链”。当通道开放时, “球”可随机弹跳, 链上带正电荷的氨基酸残基将“球”导入失活结合位点, 并阻塞通道。“链”的长短可明显改变通道的失活速度, 如果切掉shaker K+通道的N端, 快速失活过程也随之消失, 因此也称为N型失活, 为快速失活, 约数毫秒即可完成。不同通道堵塞的位点不同, shaker K+通道的位点在S4与S5之间的连接肽链上。 但是, 多种电压依赖性K+通道不表现为N型失活, 去除N端部分不影响通道的失活过程, 而改变通道外口的结构, 可使通道失活。此类失活方式为通道的缓慢C型失活, 延迟整流K+通道属此类失活。L型Ca2+通道还有另外一种电压依赖性失活方式, 为Ca2+依赖性失活, 具有重要的生理意义。 “Hinged door”机制, 与Ⅲ和Ⅳ结构域之间的异亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸以及位于Ⅲ与Ⅳ结构域的S4～S5在细胞内的连接肽链有关, 为Na+通道的主要失活方式。 人类心脏Na+通道是由一个α亚基 (230 kD、约2 016个氨基酸) 和β1、β2亚基共同构成的。其中α亚基是完成功能的主要部分, 但与β亚基共同表达可增加功能性通道的数量, 改善门控特性。心肌细胞Na+通道的主要功能如下。 (1) 产生足够强大的内向电流, 使相邻心肌细胞去极化并达到Na+通道开放的阈电位, 以保证心脏兴奋的快速扩播。若Na+通道失活关闭不正常, 则使动作电位时程 (APD) 明显延长。长QT综合征部分患者因染色体3p21-24 Na+通道基因突变, 引起失活门部位的三个氨基酸缺失, Na+通道关闭不正常, Na+内流增加, APD异常延长, 引起早期后除极, 并可能诱发严重的室性心律失常——尖端扭转性室性心动过速, 是这种遗传性疾病病人心脏性猝死的主要原因。 (2) 使其它电压依赖性通道开放, 如Ca2+通