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3种生物杀线虫剂及其复配剂对根结线结线和松材线虫病的致死力测定 目前，植物线虫的防治主要是物理防治，但防治效果差、污染环境。因此, 国内外一些研究者开始探索用生物、物理等方法防治植物线虫。20世纪80年代初美国等一些国家以高效低毒、杀线虫谱极宽、对环境副作用较小的阿维菌素作为一种生物源杀线虫剂。1997年研制新的防治线虫生物菌剂DiT, 被证明对多种植物线虫有效, 并有增产的效果。但目前, 生物源杀线虫剂种类仍然较少。 鉴于上述, 本试验筛选出3种新研制的生物杀线剂, 以取代化学杀线剂。对新研制的3种生物杀线虫制剂及其复配剂对危害植物的根结线虫 (Meloidogyenspp.) 和松材线虫 (Bursaphe lenchusxy Lophilus) 进行了室内致死力测定, 以确定生物制剂的杀线虫效果, 进而探讨生物杀线剂田间防治植物线虫和保护生态环境的可能性。 1 材料和方法 1.1 杀线剂2昆虫代谢产物,代谢产物2 杀线剂1 (低毒生物源杀线剂, 液体, 含1.8%阿维菌素, 中国农业大学应化系农药组研制) 稀释倍数为1 000、2 000倍液;杀线剂2 (昆虫与微生物代谢产物, 固体, 主要成分为昆虫体内活性物质, 包括糖蛋白、生物蜡、酯和几丁质等, 及1% 昆虫蜂蜡, 本实验室研制) 使用浓度为0.025 g/mL;杀线剂3 (多种植物代谢产物复合液, 台湾省辑阳公司研制) 稀释比例为1∶1。 复配剂本试验配制, 杀线剂1稀释 2 000倍+杀线剂2为 0.025 g/mL 或 25 g/L; 1.2 根结线虫幼虫分离 根结线虫从北京马连洼地区根结线虫发病严重的西红柿、黄瓜大棚中, 采集根系附近2～15 cm深土壤, 运回实验室, 用改良的贝曼氏漏斗分离法分离根结线虫幼虫。松材线虫由中国林业科学院森林保护研究所线虫实验室培养、提供。取10 mL蒸馏水加于长有大量松材线虫的固体培养基中, 用吸管吸取线虫用于致死力测定。 1.3 打击液内装线剂 从各处理中吸取稀释药液5 mL于培养皿 (d=6 cm) 中, 将各线虫悬浮液分别滴入装有各种杀线剂的培养皿内, 每皿中含线虫1 000条左右。 将装有线虫的各处理及对照的培养皿置于25℃、RH 60%的恒温恒湿培养箱中培养, 每24 h从各处理及对照中随机抽查100条线虫, 记录线虫死亡数量, 计算校正死亡率。各处理3次重复, 蒸馏水为空白对照。 2 结果与分析 2.1 复配剂和杀线剂的致死效果 各种生物杀线虫剂对根结线虫的致死效果见图1。 从图1可以看出, 各时间段内经药剂处理的根结线虫死亡条数均明显高于对照。3种杀线剂及其复配制剂对根结线虫都具有强的致死效果。复配剂和杀线剂1两个处理浓度根结线虫药后48h死亡率达80%以上, 药后72h达98%。3种杀线剂与复配剂比较, 复配剂致死效果药后24h内最好, 根结线虫死亡率达80%;杀线剂1药后24h致死效果次于复配剂, 药后72h效果一致;杀线剂2致死效果药后72h高于杀线剂3。杀线剂1的两个处理对根结线虫的致死效果无显著差异。复配制剂致死力药后24h均高于各自单一效果。 2.2 复配剂死亡率 各种生物杀线虫剂对松材线虫的致死效果见图2。 图2表明各时间段内经4种药剂处理的松材线虫死亡条数均明显高于对照。药后48h, 复配剂 (杀线剂1+杀线剂2) 松材线虫死亡率达79%, 与杀线剂3的致死效果接近 (死亡率74%) ;复配剂 (死亡率) 分别高于杀线剂1和杀线剂2各自单一处理。杀线剂1 1 000倍液死亡率55%, 杀线剂12 000倍液死亡率58%;杀线剂2含量0.025g/L, 死亡率38%。药后72h, 复配剂对松材线虫死亡率达89%, 杀线剂3达74%。药后96h, 复配剂死亡率达98%, 杀线剂3达90%。3种杀线剂及其复配剂比较, 复配剂和杀线剂3对松材线虫致死效果较好。 3 不同种植物线虫的作用机理研究和应用效果 根结线虫在世界各国普遍发生, 每年造成作物减产10%以上;松材线虫为许多国家检疫对象。本次试验结果显示测试的3种生物杀线虫剂对这两种危害严重的植物线虫有明显的致死效果。 研究结果表明, 复配剂对根结线虫和松材线虫致死效果好于杀线剂1和杀线剂2各自单一处理的效果。观察中发现杀线剂1和杀线剂2复配后能产生一层厚絮状物, 该物质可能是作用于植物线虫的主要物质, 其主要成份和作用机理将有待于进一步研究。 本试验仅为室内研究结果, 有关施药时间、方法、药剂处理、田间应用效果等有待进一步试验。 农田土壤系统是许多有益生物赖以生存的生态环境, 线虫是其中主要类群之一。土壤中的线虫大多数为有益线虫, 包括食细菌、食真菌和腐生线虫。它们有较高的种群密度, 以土壤中的微生物和植物残体为营养来源, 在土壤腐屑食物网中占有重