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添加果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群数量及生产性能的影响 氨基葡萄糖和苦草芽的细菌；基础食品：150mg/kg金霉素（有效成分为15%）。基础饲粮参照NRC(1994)家禽营养需要量标准,见表1。试验鸡自由采食和饮水,饲养管理和免疫程序参照有关文献资料进行。试验地点为北京农学院实验鸡舍。 1.2 果寡糖和枯草芽孢杆菌 果寡糖由江南大学食品学院提供,组分按HPLC法测定为:单糖1.83%,蔗糖1.13%,蔗果三糖39.81%,蔗果四糖49.78%,蔗果五糖7.06%;枯草芽孢杆菌为本课题组跨越计划项目“安全畜牧微生物饲料生产与使用技术(中试)科研成果,枯草芽孢杆菌总含量(60±5)亿/g。 1.3 肠道检测细菌数量 1.3.1 生产性能 于0,3,6周龄时分别按每个重复进行称重;于3,6周龄末时按重复结算饲料消耗量。以重复为单位分别计算各处理组肉鸡的平均日增重、平均日采食量和饲料转化率。 每日定期观察试验鸡的健康状况,记录腹泻鸡数和死淘数,腹泻的标准为在泄殖腔口可见明显的干或稀湿粪便黏附。以重复为统计单位,分别计算各处理组试验鸡的腹泻率和死淘率。 1.3.2 肠道菌群数量 分别从21日龄和42日龄各处理组中随机选取6只试鸡,肌肉注射戊巴比妥酸钠麻醉后,迅速解剖,截取盲肠末端2 cm肠段,液氮保存至实验分析。 将样品从液氮中取出,在超净操作台内进行10-4~10-9倍比稀释。本试验拟测定肉鸡盲肠内容物中大肠杆菌、沙门氏菌、总需氧菌和乳酸杆菌的数量。大肠杆菌、沙门氏菌和总需氧菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)各200 μL分别接种于伊红美兰琼脂、SS琼脂和营养琼脂培养基平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,在37℃生化培养箱中有氧培养24 h后菌落计数。乳酸杆菌:将盲肠内容物的稀释液(每类细菌分设3个适宜梯度)200 μL接种于乳酸杆菌选择性培养(LBS)平皿上(各稀释度分设3个重复),用灭菌曲玻棒小心摊匀,将培养平皿置于自制厌氧罐中,在37℃生化培养箱中培养48 h后进行菌落计数。 平皿培养后,选择最适宜的稀释梯度(以长30~300个菌落为宜),对4种微生物进行平板菌落计数,求其平均值并计算每克肠道内容物所含的细菌数(LgCFU/g)。 1.4 数据处理 采用SPSS 11.0软件,对所有试验数据进行单因素方差分析,差异显著者再作Duncan氏多重比较。 2 抗生素的影响 2.1 果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响 由表2可见,果寡糖、枯草芽孢杆菌和果寡糖+枯草芽孢杆菌均显著(P0.05)提高肉鸡生长全期(0~6周龄)的平均日增重,但果寡糖对0~3周龄肉鸡平均日增重的影响不明显;抗生素虽然显著(P0.05)提高0~3周龄肉鸡的平均日增重,但这种影响未能在3~6周龄和0~6周龄表现出来。果寡糖、枯草芽孢杆菌、果寡糖+枯草芽孢杆菌和抗生素均显著(P0.05)改善肉鸡生长全期(0~6周龄)的饲料转化率;与果寡糖、枯草芽孢杆菌和果寡糖+枯草芽孢杆菌不同的是,抗生素对饲料转化率的影响主要体现在0~3周龄阶段。各处理组之间平均日采食量的差异均不显著(P0.05)。 各处理组肉鸡的腹泻主要出现在0~3周龄;腹泻率以抗生素组为最低,枯草芽孢杆菌组和果寡糖+枯草芽孢杆菌组其次,果寡糖组则与对照组差异不显著(P0.05)。本试验肉鸡的死淘率都很低,仅有零星个例发生,各处理组之间差异均不显著 3 果寡糖和枯草芽孢杆菌对鸡肉盲肠微生物的影响 肠道菌群存在于宿主动物的消化道中,受饲料和环境等因素的影响而发生变化。抗生素早在20世纪40年代就开始用于调控畜禽消化道微生物区系,曾对饲料工业的发展起到重要推动作用。现有的科研和生产都表明,抗生素不但在促生长机理方面不明确,而且在实际应用中还存在一系列以下问题,如残留、耐药性、二重感染和降低机体免疫力等,其应用受到了很大的限制。因此,研制安全性高的抗生素和抗生素的替代品已成为研究热点。 国内外众多报道认为,果寡糖、益生素及其合生元等微生态制剂能够调控畜禽消化道微生态环境,提高其生产性能和改善机体健康状况。在本研究中,果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡盲肠微生物的影响较为相似,而与金霉素有较大的不同。这两种添加剂都减少肉鸡盲肠中的总需氧菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量,增加乳酸杆菌的数量;而且随着肉鸡的生长,这种作用更加明显。据报道,芽孢杆菌可使胃肠道内有益菌如乳酸杆菌和链球菌的数量增加,这些细菌会产生大量的有机酸使肠道内pH下降,从而抑制胃肠道内病原菌的繁殖;而且有报道已从芽孢杆菌中分离出杆菌肽,这也可抑制病原菌的繁殖。芽孢杆菌虽然耐热,有利于饲料加工,但由于不是畜禽消化道主要正常菌群,在消化道内发芽和定植不稳定,使其推广应用受到一定的限制。 果寡糖是一种非消化寡糖,不能被单胃动物体