纯固体甘蔗糖蜜与液体甘蔗糖蜜发酵生产酒精的对比研究.docxVIP

纯固体甘蔗糖蜜与液体甘蔗糖蜜发酵生产酒精的对比研究 1 甘蔗糖蜜的生产 甘蔗糖蜜是甘蔗糖厂的副产品，俗称糖蜜，俗称橙色。它是以甘蔗为原料，蔗汁经澄清、净化、过滤处理，蒸发浓缩、结晶、再分离出来的褐色粘稠状液体，其产量为原料甘蔗的2.5～3.0%。甘蔗糖蜜国内主要的利用途径是发酵生产酒精、酵母等。目前甘蔗糖蜜主要以液体的形式运输、存储和使用，成本较高，因此很难长距离运输到我国比如湖南，河南等需要大量使用甘蔗糖蜜的省份区域，这就限制了甘蔗糖蜜应用范围，制约了甘蔗糖蜜产业的发展。为了克服这一问题，我们已经研制出纯固体甘蔗糖蜜（具体内容已发表于《广西轻工业》2011年第9期）。根据糖蜜酒精生产技术考核指标，本文将通过发酵前后还原糖含量、残锤度和产酒量三个指标对比研究纯固体甘蔗糖蜜（以下简称固体糖蜜）与液体甘蔗糖蜜（以下简称液体糖蜜）在发酵生产酒精上的区别。 2 材料和方法 2.1 试剂与仪器 液体甘蔗糖蜜：广西农垦糖业集团金光制糖有限公司； 纯固体甘蔗糖蜜：以液体甘蔗糖蜜为原料制备而得； 活性干酵母：湖北安琪酵母股份有限公司； 无水葡萄糖：天津市大茂化学试剂厂； 菲林试剂：按GB/T 603-2002配制，均为分析纯； 数字阿贝折射仪：上海精密科学仪器有限公司； 恒温培养振荡器：上海智诚科学仪器有限公司； 微生物生化恒温培养箱：上海悦丰仪器仪表有限公司。 1.2 方法 1.2.1 固体糖蜜与液体糖蜜在发酵生产酒精中的最佳工艺和操作对比 种子培养→原料稀释→接种→发酵→蒸馏 本实验主要通过发酵前后还原糖含量、残锤度和产酒量三个指标对比研究固体糖蜜与液体糖蜜在发酵生产酒精上的区别，所以除了原料分别为固体糖蜜和液体糖蜜外，其他的工艺流程和实验操作均相同。 1.2.2 活性干酵母的制备 取液体糖蜜（原锤度为75°BX）适量，稀释至15.0°BX，取稀释后的糖液300ml至于500ml三角瓶中，加尿素0.2g，磷酸0.1ml，安琪活性干酵母0.2g，混匀、盖好棉塞后置于恒温培养振荡器（摇床）中培养，28℃，20小时。 1.2.3 原料稀释 分别取固体糖蜜和液体糖蜜适量，均稀释至28.5°BX。 1.2.4 发酵液接种量的确定 分别取稀释后的糖液各600ml于1000ml三角瓶中，均添加60ml种子发酵液（即接种量为1/10），接种后发酵液的锤度为27.0°BX，固体糖蜜与液体糖蜜分别做三个平行试验。 1.2.5 发酵 将三角瓶转入微生物生化恒温培养箱中培养，温度为32℃，时间为120小时。 1.3 糖含量的测定 1.3.1 方法 直接滴定法。 1.3.2 还原糖的制备 利用费林溶液与还原糖共沸，生成氧化亚铜沉淀的反应，以次甲基蓝为指示液，以样品滴定煮沸的费林溶液，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原为无色，以示终点。根据样品消耗量求得还原糖的含量。 1.3.3 试剂的制备 1.3.3. 无水葡萄糖的制备 2.5g/L：精确称取无水2.5g（称准至0.0001g）在105～110℃烘箱内烘干3h并在干燥器中冷却的无水葡萄糖，用水溶解并定容至1000mL。 1.3.3. 2次通用域名蓝指示液 10g/L：称取1.0g次甲基蓝，溶解于水中，稀释至100mL。 1.3.3. 葡萄糖标准溶液体积测定 (1）配制：按GB/T 603-2002配制。 (2）标定预备试验：吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5.00mL于250mL三角瓶中，加50mL水，摇匀，在电炉上加热至沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色将消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示液，继续滴至蓝色消失，记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积。 (3）正式试验：吸取费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5.00mL于250mL三角瓶中，加50mL水和比预备试验少1mL的葡萄糖标准溶液，加热至沸，并保持2min，加2滴次甲基蓝指示液，在沸腾状态下于1min内用葡萄糖标准溶液滴至终点，记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。 (4）计算 式中，F：费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5 ml相当于葡萄糖的克数，g;M：称取葡萄糖的质量，g;V：消耗葡萄糖标准溶液的总体积，ml。 1.3.4 样品制备 准确吸取一定量的样品（V1）于100 ml容量瓶中，使之所含还原糖量为0.2～0.4g，加水定容至刻度。 1.3.5 分析步骤 以试样代替葡萄糖标准溶液，按1.3.3.2同样操作，记录消耗试样的体积（V3），结果按式（2）计算。 1.3.6 葡萄糖含量的计算 式中，X：还原糖的含量，%；F：费林溶液Ⅰ、Ⅱ各5mL相当于葡萄糖的克数，g;V1：吸取的样品体积，ml;V2：样品稀释后定容的体积，ml;V3：消耗试样的体积，ml;Q：样品取样量，g。 1.3.7 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的2%。 1.