心脑脉络复元汤对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用.docxVIP

心脑脉络复元汤对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血的保护作用 大规模异丙醇可复制心血管疾病的动物模型，导致类似于缺血性心肌损伤的病理改变1。心脑脉络复元汤是武汉市中医医院桂裕江主任医师的经验方, 具有行气活血、化痰通络、扶正宁心的作用, 临床证明能有效防治冠心病。本研究采用心脑脉络复元汤对心肌损伤大鼠模型进行干预, 观察其对模型血清中肌酸激酶同工酶 (CK - MB) 、心肌肌钙蛋白I (c Tn I) 、超氧化物歧化酶 (SOD) 、丙二醛 (MDA) 、内皮素- 1 (ET - 1) 及超敏C反应蛋白 (hs - CRP) 含量的影响, 探讨心脑脉络复元汤对缺血性心肌损伤的保护作用。 1 材料和方法 1.1 动物许可证号 健康雄性Wistar大鼠40 只, 体重 (300 ± 20) g (由湖北省实验动物研究中心提供, 动物许可证号:SCXK (鄂) 2008 - 0005) 。 1.2 心脑脉络复元汤药物治疗 盐酸异丙肾上腺素注射液 (上海禾丰制药有限公司生产, 批号:120303) ;复方丹参片 (0. 6g/片, 北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂生产, 批号:1123572) , 实验前研末以生理盐水配制成0. 1g/m L浓度悬液;心脑脉络复元汤 (主要由黄芪、麦冬、黄精、瓜蒌皮、薤白、丹参、川芎、郁金等组成, 武汉市中医医院制剂室提供。水煎煮沸后, 再续煎30min, 取汁2 次, 浓缩至含生药量1. 5g/m L药液) 。 1.3 生物工程与设备 CK - MB、c Tn I、SOD、MDA、ET - 1 和hs - CRP ELISA试剂盒 ( 批号分别是: 购自武汉华美生物工程有限公司) 。ELX800 酶标仪 (美国Bio Tek公司) ;TDZ4 WS台式低速自动平衡离心机 (长沙湘智离心机仪器有限公司生产) ;DHP- 9082 型电热恒温培养箱 ( 上海医用恒温设备厂生产) 。 1.4 麻醉药物干预实验 大鼠先作ECG检查, 弃去ST - T有异常改变者和心律失常者, 完全随机分为4 组, 每组10 只, 分别为生理盐水对照组、异丙肾上腺素缺血模型对照组、复方丹参片干预对照组和心脑脉络复元汤干预组。动物饲养3d, 以适应环境及消除麻醉药物对大鼠的影响。第4 天开始灌胃给药, 前两组灌服生理盐水, 后两组给予相应的药液8m L/kg, 每天1 次, 连续灌服9d。 1.5 异丙肾上腺素注射前后ecg 末次灌胃2h后, 给予生理盐水组大鼠皮下多点注射生理盐水80m L/kg, 其余3 组大鼠皮下多点注射异丙肾上腺素40mg/kg。记录注射前和注射后20min时的ECG, 观察ST - T等改变情况。注射异丙肾上腺素20min后, 可见室性早搏, ST段明显抬高。注射2h后各组再灌服相应药物1 次。 皮下注射异丙肾上腺素24h后经大鼠心脏取血, 每只大鼠取血5m L。常温离心, 分离血清, 检测CK - MB、c Tn I、SOD 、MDA、ET - 1、hs - CRP等各项生化指标, 含量测定均采用ELISA法。 1.6 单因素方差分析 数据以均数 ± 标准差 (ue0af± s) 表示, 多组间比较用单因素方差分析, 两两比较用q检验, 以P 0. 05 为有显著性差异, P 0. 01 为有非常显著性差异。所有数据用SPSS18. 0 统计学软件进行分析处理。 2 盐水对小鼠血清p、sod、p含量的影响 异丙肾上腺素组大鼠血清中CK - MB、c Tn I、MDA、ET - 1、hs - CRP含量明显高于生理盐水组 ( P 0. 01 ) , SOD含量明显低于生理盐水组 (P 0. 01) 。心脑脉络复元汤组大鼠血清中CK - MB、c Tn I、MDA、ET - 1、hs - CRP含量明显低于异丙肾上腺素组 (P 0. 01) , 见表1。 3 心脑粒径复元汤的检测 SOD、MDA与心肌缺血:当心肌缺血缺氧时, 大量产生的氧自由基 (OFR) 及其通过与不饱和脂肪酸作用引发脂质过氧化反应生成的MDA, 可通过多种途径造成细胞膜及亚细胞器膜结构破坏, 导致心肌细胞损伤。MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应过程中一种较稳定的代谢产物, 其含量变化可反映机体脂质过氧化的程度, 间接反映细胞损伤的程度。SOD是广泛存在于需氧代谢细胞中的一种自由基清除剂, 它可保护细胞和基质免受氧自由基的损害, 对过氧化脂质的形成有阻止作用。其活力的高低可以反映体内自由基的变化情况。冠心病心肌缺血缺氧时, MDA含量升高, SOD含量降低［2］。通过检测SOD活