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蛇床子素的提取、分离、生物活性及提取方法 又名欧芹酚或欧芹酚（ost），其化学名称为7-甲基-8异戊醇香豆素（7-met-8-3-met-2-eny1）。这是第一个从未经处理的天然香豆素类化合物中提取出来的。杏金属科植物的蛇床干燥成熟，是一个著名的名字。现代药理实验研究表明, 蛇床子素具有抗骨质疏松症、抗高血压、抗心律失常、抗衰老、抗肿瘤、抗凝血、抗菌、杀虫、抗炎镇痛等功效。本文就其分布、结构、性质、提取、分离、生物活性进行了阐述。 (一) 植物的分布 蛇床子素存在于多种植物中, 主要分布在伞形科的当归属、古当归属、绵果芹属、蛇床属、阿魏属、独活属、岩风属、欧防风属、欧芹属、前胡属、茴芹属、栓翅芹属、亮蛇床属、西风芹属、白芷属15属的植物中以及芸香科的柑橘属、黄皮属、象橘属、巨盘木属、拟芸香属、蜜茱萸属、小芸木属、九里香属、毛果芸香属、枳属、茵芋属、Limonia属、Myrtopsis属、Pentaceras属、Phebalium属、Thamnosma属、Ticorea属17属植物中, 另外在菊科和豆科少数种中也有分布。 (二) 蛇床子素的结构 蛇床子素属于香豆素类化合物, 其核心结构由苯环和吡喃酮环组成。作为香豆索类化合物的一员, 蛇床子素除具有香豆素的核心结构外, 还有异戊烯结构, 异戊烯结构化合物作为植保素在抗病中有着重要作用。其结构式为: 蛇床子素为白色针状结晶 (无水乙醇) , 紫外光下呈淡蓝色;熔点:83℃~84℃;沸点:145℃~l50℃;分子式:C15H1603;溶解度 (g/L, 20℃) :不溶于水和冷石油醚, 溶于碱水、丙酮、甲醇、乙醇、氯仿、乙醚、乙酸乙酯, 可溶于沸腾的石油醚;通常条件下稳定, 在p H为5~9溶液中无分解现象。 (三) 提取蛇床子素的分离方法 1. 蛇床子素提取方法 蛇床子素提取方法主要为溶剂提取法、酸碱法、超声提取法、超临界CO2萃取法等。 (1) 溶剂提取法。张荣等采用水煎醇沉法、醇提水沉法、氯仿复提法三种方法提取蛇床子素, 结果表明:水煎醇沉法收率低、含量低, 不适宜作为蛇床子素的提取方法;醇提水沉法含量、收率都较高, 操作简便;氯仿复提法含量高, 收率也较高, 适合制备高含量的蛇床子素;但氯仿复提法中用到毒性大且价格昂贵的氯仿, 醇提水沉法相对于氯仿复提法较适合作为蛇床子素大生产或实验室提取方法, 且含量也能达到一般制剂的要求。刘江琴等研究不同极性的溶剂回流提取蛇床子素, 在相同温度下, 氯仿、丙酮提取率较高, 但丙酮挥发性大, 易燃, 安全性差, 氯仿毒性大且价格昂贵, 不适于生产性提取。尚飞等采用正交实验, 以提取物中的蛇床子素含量为指标, 优化得最佳提取工艺为:以8倍体积的65%乙醇, 提取3次, 每次1h。该工艺降低了提取溶剂乙醇的浓度, 缩短了提取时间, 减少了原料与蛇床子素受热时间。 (2) 酸碱法和超声提取法。张玉艳等采用水煎煮提取、乙醇超声提取、碱浸渍法、碱溶酸沉超声提取方法研究蛇床子素提取工艺, 结果表明:碱溶酸沉超声提取法提取率最高。最佳提取工艺为:30倍2%Na OH溶液, 浸泡时间1.5h, 超声时间l0min。该工艺无需加热, 不使用有机溶剂, 成本低, 安全性好。吴芳等以蛇床子素、欧前胡素为定量指标成分, 探讨蛇床子总香豆素的提取分离的优化条件, 采用超声方法提取并进行了正交优选, 优选的超声提取条件效率高, 可增加蛇床子药材的利用率。 (3) 超临界CO2萃取法。苑振亭等采用超临界CO2萃取法研究蛇床子素的提取工艺, 通过分析萃取压力、解析压力、温度、静态时间及颗粒粒度对蛇床子素含量的影响, 优化了萃取工艺。宫竹云等对超临界CO2萃取全过程采用二次回归连贯设计法对五因素及其交互作用进行研究, 确定了各因素及其交互作用对蛇床子素提取率的影响规律, 优化的工艺条件为:萃取压力为40MPa, 萃取温度40℃;分离I温度45℃;分离Ⅱ压力为5MPa, 分离Ⅱ温度为46℃;CO2流量为18L/h, 萃取时间为80min, 蛇床子素提取率可达4.32%。超临界CO2萃取蛇床子萃取物中蛇床子素含量较高, 具有工艺简单、提取效率高、无有机溶济残留、操作条件温和、活性成分不容易被破坏而保持天然特征等优点。 2. 蛇床子素的分离 蛇床子素分离的主要方法:重结晶法、包结结晶法、色谱法等。弥宏等用无水乙醇超声溶解蛇床子提取物, 离心, 取上清液, 反复重结晶分离得蛇床子素。张杰利用超分子化学的分子识别原理, 应用包结结晶法成功地分离出独活粗提物中的蛇床子素, 该法具有操作简单、快速、产品纯度高等优点。 结构相似的香豆素多数情况下采用色谱方法能有效的分离。硅胶柱色谱法、大孔树脂法、高速逆流色谱技术已成功的用于分离蛇床子素。梁波等以95%乙醇提取野生的长春七果实, 经硅胶