第5章有丝分裂前半段.pptVIP

一、周期蛋白 B1-Cdk1受到其亚细胞定位变化的调节 细胞周期控制的一个核心概念——也适用于一般意义上的细胞功能调节——是调控蛋白的功能不仅受到它们内在活性变化的控制，也受到细胞内定位变化的调节。 周期蛋白B1-Cdk1进入细胞核内：在前期的末段瞬间进入，大部分。 周期蛋白 B1-Cdk1停留在细胞质：少部分，促进其他有丝分裂的过程，如中心体的分开和高尔基体的重构。 本文档共68页；当前第31页；编辑于星期三\8点34分 一、周期蛋白 B1-Cdk1受到其亚细胞定位变化的调节 与大部分蛋白一样，周期蛋白 B1-Cdk1的核质比率受到蛋白核输入与核输出相对比例的控制。在有丝分裂前，周期蛋白 B1-Cdk1输入的比率很低而输出比率较高，因而产生净的细胞质定位。然而在前期的末段，输入比率增加而输出比率降低，使周期蛋白 B1-Cdk1在细胞核内聚集。 Cdk1和Plk磷酸化周期蛋白 B1和Cdc25C。这就遮蔽了两个蛋白上的核输出信号，减少了它们核输出的比率 本文档共68页；当前第32页；编辑于星期三\8点34分 一、周期蛋白 B1-Cdk1受到其亚细胞定位变化的调节 输出受到称为核输出信号的短序列的引导，该序列主要定位在周期蛋白 B1的氨基端区域，该序列能与携带周期蛋白 B1-Cdk1出核的转运子蛋白Crm1结合。 有丝分裂的早期，核内输出信号上的Ser113被磷酸化，从而阻断了与Crm1的结合，减少了输出比率。 本文档共68页；当前第33页；编辑于星期三\8点34分 二、Cdc25C定位受到磷酸化的调节 Cdc25C的定位依赖于核输入与输出的相对比率。Cdc25C由不同的机制进行输入和输出，但两者都受到磷酸化的调节。 与很多能在核质穿梭的蛋白一样，Cdc25C含有能与核输入运载体作用的核定位信号，以及能与Crm1输出因子作用的核输出信号，这些信号定位在蛋白氨基端区域的不同部位。 Cdc25C在靠近核定位信号的Ser216（人）或Ser287（非洲爪蟾）被磷酸化，为称为14-3-3的小磷酸化丝氨酸结合蛋白提供了结合位点，这就遮蔽了核定位信号，因而减少了Cdc25c的核输入（不影响核输出信号） 本文档共68页；当前第34页；编辑于星期三\8点34分 二、Cdc25C定位受到磷酸化的调节 对作用于Ser216/287的激酶和磷酸酶的了解还比较少。磷酸化这一位点的两个激酶，Chk1和Chk2，在DNA损伤后激活。它们对Ser216/287的磷酸化可能为DNA损伤而抑制有丝分裂的进入提供了理论基础。 Cdc25C的核输出信号位于靠近有丝分裂期启动Cdc25C激活的多个磷酸化位点处。这一区域的磷酸化——可能受Plk和Cdk1作用——不仅刺激了Cdc25C活性，也遮蔽了核输出信号，从而减少了核输出比率。Plk因此似乎也能同时促进Cdc25C及其靶标周期蛋白B1-Cdk1在细胞核内积累和激活。 本文档共68页；当前第35页；编辑于星期三\8点34分 第七节 Polo和Aurora蛋白激酶家族 本文档共68页；当前第36页；编辑于星期三\8点34分 一、Plks有助于控制纺锤体的组装及有丝分裂的退出 很多其他蛋白激酶在有丝分裂起始时被激活并有助于控制一系列早期有丝分裂事件。这些有丝分裂激酶中最重要的是 polo-like激酶，Plk aurora A和aurora B 的蛋白激酶。 本文档共68页；当前第37页；编辑于星期三\8点34分 一、Plks有助于控制纺锤体的组装及有丝分裂的退出 Plk的氨基端含有与其他激酶相似的蛋白激酶催化结构域，Plk的羧基端则含有成为polo盒结构域，它们能将激酶靶向到特定底物及亚细胞位置。 polo盒结构域对于在蛋白特定序列的丝氨酸或苏氨酸位点发生磷酸化的蛋白质具有着高度的亲和力。 本文档共68页；当前第38页；编辑于星期三\8点34分 一、Plks有助于控制纺锤体的组装及有丝分裂的退出 Plk在有丝分裂早期被激活： 基因表达增加。 特定激活位点被磷酸化 Plks也含有将自身靶向到泛素-蛋白连接酶APCCdh1的序列基序，可使自身在有丝分裂后半段及G1期发生时被蛋白酶解。 本文档共68页；当前第39页；编辑于星期三\8点34分 一、Plks有助于控制纺锤体的组装及有丝分裂的退出 Plks在M期前半段和后半段都有着极广泛的功能，尤其在纺锤体组装和胞质分裂过程中。 Plk对于中心体分开和两极纺锤体的构建是必需的。突变果蝇或裂殖酵母的Plk基因，将抗Plk的抗体注射入人或蛙胚胎，可以产生单极或异常的纺锤体。 Plk 在有丝分裂前半段定位于中心体处，在该位点可进一步支持其功能发挥。 本文档共68页；当前第40页；编辑于星期三\8点34分 一、Plks