邻二氮菲分光光度法测定黄瓜中的微量铁.docxVIP

邻二氮菲分光光度法测定黄瓜中的微量铁 黄瓜原为胡瓜，原产于印度。西汉的张骞当上了西域时，他被引入了中国。黄瓜肉质脆嫩,汁多味甘,生食生津解渴,且有特殊芳香。据分析,黄瓜含水分98%,并含有少量的维生素C、胡萝卜素、蛋白质、钙、磷、铁等人体必需的营养素,长久以来一直受到人们的青睐。用邻二氮菲法测定黄瓜中微量铁,准确方便,可作为果蔬中微量铁的测定方法。 1 材料和方法 1.1 仪器和试剂 新鲜黄瓜 西安地区生产;铁标准溶液(50.0、5.0μg/mL)、盐酸羟胺溶液(10%、50g/L用时配制)、氢氧化钠(1.0mol/L)、乙酸溶液(1.0mol/L)、邻二氮菲溶液(1.5g/L、0.1%、0.02%) 均为分析纯。 SQ2119粉碎机 慈溪市西贝乐电器有限公司;AR2140电子天平 奥豪斯国际贸易公司;7504紫外-可见分光度计 上海欣茂仪器有限公司; pHS-3C型精密酸度计 上海医疗器械厂;常用的理化仪器一套。 1.2 测量 1.2.1 黄瓜汁的制备 选取新鲜优质的黄瓜,用流动水洗净。用不锈钢破碎机将黄瓜破碎成碎块,及时把黄瓜碎块送入榨汁机。用螺旋压榨机把破碎后的黄瓜榨出汁,过滤备用。 1.2.2 试剂的制备 1.2.2. 硫酸溶液的配制 准确称取0.4317g NH4Fe(SO4)2·12H2O置于烧杯中,加入5mL 3mol/L硫酸溶液,移入500mL的容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。 1.2.2. 2.铁粉5.0g，l 移取50.0μg/L的铁标准溶液5.0mL于50mL容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。 1.2.2. 3-二氮菲溶液1.5g/l 先用少量乙醇溶解,再用蒸馏水稀释至所需浓度,摇匀(避光保存,一周有效)。 1.2.3 邻二氮菲、盐酸羟胺溶液的配制 取黄瓜汁0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,分别置于6只50mL的容量瓶中,各加入10%盐酸羟胺溶液,10min后,再各加5mL 1mol/L醋酸钠溶液及3mL 0.1%邻二氮菲溶液。用水稀释至刻度,摇匀,用7504紫外-分光光度计在最大吸收波长(510nm)处,测定各溶液的吸光度,根据其吸光度,在标准曲线查出5mL黄瓜液中铁的含量。 1.2.4 邻二氮菲的用量 在8只容量瓶中分别加入50.0μg/mL铁标准溶液10mL、50.0g/L盐酸羟胺溶液1mL、1.5g/L邻二氮菲溶液2mL、1mol/L醋酸钠溶液5mL,然后依次加入0.02%邻二氮菲0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL。用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。以蒸馏水为空白液,测定各溶液的吸光度。以邻二氮菲与铁的摩尔比为横坐标,吸光度为纵坐标作图,曲线上前后两部分延长线的焦点位置就是邻二氮菲与铁的摩尔比。本实验得出邻二氮菲与铁的摩尔比为1∶3。 1.2.5 显色条件和测量条件选择 可见分光度法测定微量离子要经过显色和测量两个过程,为了使测量结果的灵敏度和准确度高,必须选择合适的显色和测量条件。这些条件主要为:测量波长(nm)、显色剂用量(g/L)、有色配合物的稳定时间(min)和试液的pH,按照4因素3水平进行L9(34)正交实验,因素水平见表1。 2 结果与讨论 2.1 邻菲罗啉溶液配制 分别于6只50mL的容量瓶中,依次加入5.0μg/mL铁标准溶液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL,各加入10%盐酸羟胺溶液,20min后,再各加5mL 1mol/L醋酸钠溶液及3mL 0.1%邻菲罗啉溶液。用水稀释至刻度,摇匀。用7504紫外-分光光度计在最大吸收波长处(510nm)处,测定各溶液的吸光度,以铁溶液体积为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程为Y=0.0867X+0.0223,R2=0.9987。 2.2 单因素试验分析 2.2.1 邻二氮菲溶液对醋酸钠吸光度的影响 取2个50mL的洁净容量瓶,移取5.0mL 5.0μg/mL铁标准溶液于其中一个容量瓶中,然后在两个容量瓶中加入50.0g/L盐酸羟胺溶液,摇匀,放置10min,各加入1.5g/L邻二氮菲溶液和5mL醋酸钠溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。以试剂空白为参比,在500～520nm之间,每隔5nm测量吸光度。结果如图1所示,随着波长的增加,吸光度也增加;当波长增加到515nm时,吸光度达到最大值,则其最大吸收波长为515nm。 2.2.2 邻二氮菲、醋酸钠溶液的配制 取2个50mL的洁净容量瓶,各加入5.0mL 5.0μg/mL铁标准溶液、1mL 50.0g/L盐酸羟胺溶液,摇匀,分别加入0.0、0.25、0.5、1.0、1.5mL 1.5g/L邻二氮菲溶液、2mL醋酸钠溶液,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀。以试剂空白为参比,在515nm下测定吸光度。 结果如图2所