枕大池注射硝普钠对兔蛛网膜下腔出血后延迟性脑血管痉挛的逆转作用.docxVIP

枕大池注射硝普钠对兔蛛网膜下腔出血后延迟性脑血管痉挛的逆转作用 延迟性脑痉挛（cdv）是蜘蛛膜下腔出血（sah）的常见并发症，可导致严重的局部脑组织缺氧和脑梗死。我们在兔枕大池两次注血致DCV模型中，鞘内注射硝普钠（SNP），对兔基底动脉的影响进行了初步观察，报道如下。 1 材料和方法 1.1 两组重血压病发生率比较 35只新西兰大白兔，雌雄不拘，体质量2.5～2.9 kg，分为两组：空白对照组（组1)6只，注血组29只。注血组由于麻醉失误、注血等原因死亡5只，余24只分为实验对照组（组2），治疗后1 h组（组3）,4 h组（组4）,24 h组（组5），每组6只；各组间体质量无统计学差异（P0.05）。 1.2 回血气多血穿刺 采用硫喷妥钠90 mg/kg兔颈部肌肉注射麻醉。兔头屈曲，在兔枕部后方的凹陷处用7号输液针头穿刺，抽出约1 ml脑脊液，然后注入从耳中央动脉抽取的自体血0.5 ml/kg。48 h后以同样方法行第2次注血。 1.3 剂量和浓度 枕大池注射SNP的剂量和浓度经预实验取得，剂量0.06 mg/kg，浓度50 mg/100 ml。注药时以3倍的脑脊液稀释后缓慢注入枕大池内。 1.4 %戊二醛家兔脑基底的观察 兔麻醉后开胸阻断上、下腔静脉及胸主动脉，剪开上腔静脉，用套管针穿刺胸主动脉行上半身灌注。先用肝素盐水快速冲洗，待静脉内流出液接近清亮时换3%戊二醛（p H=7.4），灌注约250 ml后快速开颅，取出兔脑进行观察，并记录基底池内血凝块量。血块包绕基底动脉1/3以下记录为少量，1/3～2/3为中量，2/3以上为大量。在显微镜下取基底动脉，浸入3%戊二醛固定。于基底动脉中段取标本制作石蜡切片，每份连续切片10～20张，行苏木精-伊红染色。每组随机抽2份行扫描电镜观察。 1.5 血管厚度测量 由2名实验人员分别选择截面呈圆形的血管用真彩色图像分析系统进行测量。如果截面不圆，则取最短径处为测量点。放大40倍测量血管壁全层厚度、内膜厚度及肌层厚度。每条血管选择3处测量点，每处测量3次，9次数值的平均值为其测量值，取2名测量员测量值的平均值为最终值。最后计算下列数值：内膜层厚度比值(%)=∑×[（内膜层厚度÷管壁厚度）×100%]÷n。肌层厚度比值（%）=∑×[（肌层厚度÷管壁厚度）×100%]÷n。 1.6 穿刺注射snp 将初次枕大池注血记为第0天，第2天再次行枕大池注血，第4天枕大池穿刺注射SNP（治疗组）或生理盐水（实验对照组）。注射后均分别于1、4、24 h行活体灌注，取标本行光镜及电镜观察。 1.7 统计处理 采用SPSS11.5统计软件包进行处理，残余血量采用等级资料秩和检验（H检验）。 2 结果 2.1 剩余血容量 脑底部残存血块量经H检验，结果无显著性差异（P0.05）。 2.2 血管内皮水肿 光镜下见空白对照组血管结构正常（图1）。实验对照组血管壁发生了明显的病理变化（图2)：(1)血管壁明显增厚，结构紊乱。(2)内膜层变形、肿胀，与内弹力膜分离或脱离。(3)内弹力膜明显迂曲、皱折，边缘不整齐，厚薄不均。(4)中膜明显变厚，平滑肌细胞排列紊乱，细胞肿胀挛缩为椭圆形。3个治疗组有同样的病理变化（图3），但程度不如对照组明显。 2.3 细胞形态表现 空白对照组血管壁超微结构正常。实验对照组血管壁超微结构的主要病理变化如下（图4,5）：(1)内皮细胞肿胀变形，胞膜呈波浪状或锯齿状，胞浆密度不均匀，内有空泡，核结构不清或变形，细胞间紧密连接处分离，内皮细胞与基底膜分离或脱落。(2)内弹力膜明显皱折，厚薄不均，多处出现断裂。(3)平滑肌细胞变形，呈不规则圆形或多边形，相互间关系紊乱。可见细胞坏死、变形、核扭曲、染色质不均匀、空泡形成等。3个治疗组均有上述改变，但程度不如实验对照组明显。 2.4 两组肌层厚度比值比较 空白对照组（组1）与实验对照组（组2）、实验对照组（组2）与治疗后24 h组（组5）肌层厚度比值之间的差异有统计学意义（P0.05），其余各组间无显著性差异。各组内膜厚度比值均无显著差异。 3 sah模型血管屈曲改变 目前的研究提示SAH后DCV的病因是多因素的，其中内皮细胞和内皮素（ET）-一氧化氮（NO）平衡系统起了很重要的作用。正常情况下，ET-NO保持着动态平衡。SAH后内皮细胞内NO减少，打破了NO与ET之间的平衡，导致DCV发生。因此在理论上，向循环系统或局部组织输入一定量的NO供体，使其在到达作用点后代谢产生NO，有可能使DCV缓解。SNP产生NO的能力较强，但其血管内应用能导致强烈的全身血管舒张，引起血压下降；而在血管外膜上应用既能舒张局部血管，又不会降低血压。脑部大血管主要位于脑底蛛网膜下腔脑池内，这为鞘内应用SNP治疗DCV提供了解剖学基础，只要将SNP注入任一脑池内，药物