利多卡因对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的预防作用.docxVIP

利多卡因对蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的预防作用 中风发作是最严重的并发症，可能是由局部脑组织缺氧引起的。可能是sah引起的严重脑损伤和脑组织梗死。这是sah致死率的主要原因。目前普遍认为多种途径可导致SAH后脑血管痉挛,但发病机制尚未完全明了,且迄今仍无有效方法防治SAH后脑血管痉挛及痉挛后脑组织损伤。有关利多卡因的脑保护效应已有诸多报道,可能与利多卡因具有多重保护机制有关。此实验旨在观察经枕大池局部注入小剂量利多卡因可否减轻脑血管痉挛以及脑组织损伤。 1 材料和方法 1.1 只随机分组 新西兰大白兔(华西医学动物中心提供)30只随机分为假手术组(sham组)、SAH组与利多卡因(lidocaine)治疗组(利多卡因组)。 1.2 仪器、试剂盒 包括Ohmeda excel 210麻醉机(美国Ohmeda公司生产)、飞利浦M1106C心电监测仪(美国飞利浦公司生产)、XH-6010A型的γ闪烁计数仪(西安二六二厂生产)、Nikon TE2000-U倒置生物显微镜(日本Nikon公司生产)、美国Image-Pro Plus专业图像分析处理软件系统(美国Media cybernetics公司开发)以及IL-6(100T×1盒)试剂盒(美国生产)。 1.3 基底动脉组织病理学检测 模型(sham组和SAH组)采用兔耳中动脉非抗凝血1.5 mL缓慢注入枕大池方法复制,sham组注入等量生理盐水(NS),注射后均取头低位。0.5 h后sham组和SAH组兔注入NS 0.1 mL,利多卡因组注入2%(质量浓度)利多卡因0.1 mL,缝合消毒伤口后于笼中饲养观察72 h。术中监测兔血压、心率、呼吸速率、耳中动脉氧饱和度(SPO2)以及鼻咽温度,使鼻咽温度维持在37～39℃。 术后72 h,经心脏灌注4%(质量浓度)多聚甲醛固定后,于视交叉后2～4 mm冠状位取脑组织及基底动脉分叉点前2 mm组织行脱水、浸蜡、包埋、切片并对海马组织行HE、c-fos免疫组化染色,于显微镜下观察基底动脉并摄像,经计算机图像分析软件处理图像后进行分析。基底动脉组织切片在40倍显微镜下照相后用美国Image-Pro Plus专业图像分析处理软件系统计算基底动脉管腔面积(artery area,AA)和直径(artery diameter,AD);海马HE染色片用双盲法随机计数10个400倍视野的海马正常神经元和c-fos阳性细胞数目(cells of expressing c-fos positive in hippocampus,CCPHP),并于40倍下照相后计算海马长度,计算出海马正常神经元密度(normal neuron density of hippocampus,NNDHP),NNDHP=海马正常神经元数/海马长度。 分别于术前和术后72 h取兔动脉血,经低温离心后取上清液于-72℃低温冰箱保存待测,采用ELISA法测定血清IL-6水平。 1.4 统计学方法 所有数据均采用xˉ±sxˉ±s表示,并采用SPSS11.5统计软件进行分析,组间比较采用单因素方差分析,组内手术前后比较采用配对t检验,以P0.05为差异有统计学意义。 2 结果 2.1 h组和利多卡因组小鼠因素 各组术后当天精神状态比较差,术后第2天sham组精神状态恢复常态,而SAH组及利多卡因组仍有不同程度萎靡、食欲下降,且SAH组部分兔观察期间发生抽动甚至角弓反张。术后72 h灌注处死兔后发现SAH组及利多卡因组在脑底部基底动脉周围有大量凝血块,甚至有硬膜下血肿,而sham组脑部未见凝血块。 2.2 两组术后体重比较 各组兔术前体重无统计学差异(P0.05);术后SAH组体重低于其他两组(均P0.05),且SAH组及利多卡因组术后体重均低于术前(P0.01)(表1)。 2.3 各组小鼠血清il-6水平 各组兔术前血清IL-6水平差异无统计学意义(P0.05);术后72 h各组血清IL-6水平均比术前增高(分别P0.01,P0.001,P0.05),SAH组血清IL-6水平高于sham组和利多卡因组(均P0.05)(表1)。SAH组与sham组和利多卡因组比较,基底动脉AA缩小、AD缩短(图1～3)、NNDHP(图4-6)减少、CCPHP(图7～9)增多(P0.05)(表1)。 3 不同原因中ue的表达 已有研究证实利多卡因具有较好的脑保护效应。Lei等发现,经静脉给予大脑中动脉栓塞的大鼠缺血再灌注损伤模型抗心律失常剂量(按体重1.5 mg/kg)的利多卡因,并在灌注期间持续泵入按体重2 mg/(kg·h)维持血药浓度在2～5 μg/mL,能明显减少脑梗死面积。 此实验结果发现,术后各组兔体重均比术前下降,尤以SAH组较为显著,这可能与手术创伤或是出血后摄食中枢受抑制导致食欲下降所致的饮食