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凡纳滨对虾limaeaeusvar代家系选育研究 家庭繁殖是获得优良品种（后代）的重要方法之一。家庭系的建立在品种遗传特性分析和育种研究方面发挥着重要作用。通过建立家庭谱系，比较和分析不同家庭的经济特性，选择不同的育种方法。这是改善水产源生物质量的重要途径。 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)俗称南美白对虾,原产于南美洲太平洋赤道南北沿海,是目前世界养殖产量最高的3大虾种之一,我国目前凡纳滨对虾养殖产量可占对虾总产量的80%以上.但凡纳滨对虾病害频繁的出现,特别是白斑综合症病毒(WSSV)的暴发使凡纳滨对虾养殖造成重大经济损失.因此选育抗WSSV的对虾是预防WSSV流行的有效措施和恢复对虾养殖产业的关键. 目前,国外对虾的选育主要以无特定病原或抗特定病原及快速生长等生物学特性为指标,选育出适应当地环境的速生或无特异病原的对虾品系.美国国家农业部(USDA)和美国夏威夷海洋研究所(OI)对凡纳滨对虾的选择育种研究是在对生长性能和TSV抗性等权重的综合选择指数进行的.Moss (1999)报道514个全同胞家系对虾的生产性能与TSV感染的家系对虾存活率呈负相关(r=-0.45);张天时(2007)采用定向交配建立了101个中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)全同胞家系和29个中国对虾半同胞家系,并对其生长发育进行了初步研究.陈锚(2008)以3个不同来源的14个凡纳滨对虾养殖群体为基础建立了206个不同的凡纳滨对虾家系,对保留下来的80个家系的生长状况进行统计和比较分析,初步建立了对虾的家系选育体系.Pan (2008)报道凡纳滨对虾抗WSSV的个体选育和一代家系选育.在此基础上,本实验连续对二代选育家系的抗病和生长进行了研究,探讨选育对虾的抗WSSV性状与生长的关系,以期为选育抗病强、生长速度快的凡纳滨对虾新品种提供科学依据. 1 材料和方法 1.1 家族史 1.1.1 人工感染wssv的亲虾 2002年11月从当年引进的无特定病原(SPF) 凡纳滨对虾亲虾(美国夏威夷)生产的子代中挑选出生长快、体格健壮等性状良好的个体作为后备亲虾,经人工感染WSSV后存活个体作为抗病亲本. 1.1.2 亲虾的家系建立 将筛选的抗病亲本(雌虾)进行眼柄切除,促进亲本成熟.对成熟亲虾采取一雌一雄一一配对建立第一代家系,专人专池饲养直至繁育从而建立16个第一代选育家系;第一代选育家系经人工感染WSSV,从中挑选出抗病力较强、生长快的家系建立21个第二代家系. 1.2 溶解氧、氨氮含量 海水经3级过滤(沙井→滤池→过滤罐),盐度为28~30,溶解氧含量为6.6~7.0 mg/dm3, 氨氮含量为0.3~0.5 mg/dm3,pH值为7.8~8.5,温度为28~31℃. 1.3 生长实验 1.3.1 家系放养及亲虾放养 第一代各家系经标粗到全长2.8~3.0 cm后,16个家系各取3 000尾虾分别放养16个室内水泥池(规格6 m×4 m×2 m),并以相同的管理措施饲养223d至后备亲虾.每个家系随机抽样60尾,测体长、体重. 1.3.2 生长特性实验 从21个第二代选育家系中,每个家系挑选60尾健康对虾,体重为2.09±0.44 g,体长为5.00±0.51 cm,分置于2个水族箱(规格70 cm×40 cm×35 cm)中,箱底及四周铺上黑色塑料膜,表面盖上黑色塑料膜以遮蔽光线,保持安静环境,微充气,每天投喂2次,投饵量为体重的3%,每天定时吸污,换水20%,暂养一周,待实验虾适应该环境后,箱中保留25尾对虾开始实验.饲养28d,实验前后,测量每个家系对虾的实验虾的体长和体重. 特定生长率的的计算方法如下: 体长特定生长率:X1=(lnLt-lnLo)/D(1) 体重特定生长率:X2=(lnWt-lnWo)/D(2) 式(1、2)中Wt、Wo为实验结束体重、初始体重;Lt、Lo为实验结束的体长、初始体长;D为实验天数. 1.4 抗病性感染实验 1.4.1 u3000基于覆盖、共投喂病毒原的分离 选取具有典型WSSV病症的患病对虾,并经PCR检验为携带有WSSV,取对虾肌肉组织0.1 g,加入1 cm3PBS,冰浴匀浆,经0.45 μm滤膜过滤除菌后,得到10-1病毒液,每尾注射0.1 cm3的10-1病毒液,收集新鲜死亡对虾作为投喂感染的病毒原. 1.4.2 wssv病虾感染检测 实验前将100 dm3实验桶清洗干净,5‰高锰酸钾溶液浸泡1 h消毒,然后冲洗干净.放虾前1 d注入海水并充气24 h.实验虾暂养5~7 d后,暂停投饵1 d,次日进行抗病感染实验. 中虾感染,每个家系取全长5.0~6.0 cm的健康中虾50尾,每尾按0.3 g WSSV病虾肌肉绞碎投喂,同时另设一平行实验组. 成虾感染,每