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3种植物次生物质对菜青虫的生物活性 蔬菜绿虫是十字花科植物的主要害虫之一。长期以来,对菜青虫的防治主要依赖大量使用化学农药,以导致蔬菜生产中的“3R” 问题(害虫产生抗药性、害虫再猖獗和农药残留)日益严重。近年来,开发和利用植物次生化合物防治害虫逐渐受到人们的重视,成为替代化学农药的一条重要途径。 从距今3.5~2.8亿年的石炭纪起,就开始了植食性昆虫与植物的协同进化历史。在漫长的昆虫与植物协同进化过程中,植物发展了许多防护机能。植物次生物质是植物次级代谢产物,在植物与昆虫的协同进化中起着主导作用。目前已知的植物次生代谢产物有3万余种,主要成分有生物碱、黄酮类、萜类等。已有学者对多种植物次生物质对害虫的控制作用进行了大量研究。本文在大量筛选试验的基础上进一步对胡椒、葱、川楝子3种提取物对菜青虫拒食活性进行测定,旨在为菜青虫无公害防治提供依据。 1 材料和方法 1.1 调查用菜粉蝶 从合肥市郊区菜地采集菜粉蝶成虫置于15 m×6 m×3 m的大棚内,棚内种植甘蓝供其产卵,用10%糖水供成虫补充营养,继代饲养,挑选健康、大小一致的菜粉蝶3龄幼虫供试。试验前饥饿4 h。胡椒、葱、川楝子购于农贸市场和药房。 1.2 方法 1.2.1 超声法提取石油醚 将洗净的植物风干后置于45 ℃恒温箱内烘干,用粉碎机粉碎制成植物干粉,加入石油醚(石油醚∶干粉=10∶1),放入超声波中提取,过滤。然后通过旋转蒸发仪蒸发浓缩,配制浓度为1 g DW/mL的母液,即为石油醚提取液。滤渣再加入丙酮(丙酮∶干粉=10∶1)提取,方法同上,即为丙酮提取液。置于4 ℃下避光冷藏。 1.2.2 试虫的制备 采用叶碟法。石油醚提取液以乙醇为溶剂,丙酮提取液以水为溶剂,用梯度稀释法将母液稀释成40、20、10、5 mg/mL 4个浓度。用打孔器(D=20 mm)将新鲜的甘蓝叶片打成叶碟,放入稀释后的供试提取物溶液浸泡5 s取出,另设对照,待叶碟干后,置于直径9 cm的培养皿中(内垫滤纸,加少量蒸馏水保湿),每皿6片接入饥饿4 h的试虫1头,5头虫为一重复,每个处理设6个重复。24、48 h后用方格纸测定取食面积,按以下公式计算拒食率: 拒食率=对照组取食量?处理组取食量对照组取食量×100%=对照组取食量-处理组取食量对照组取食量×100% 试验数据用DPS软件分析。 2 结果与分析 2.1 川髂子提取液与其他溶剂的拒食率比较,见表1。对于不同 试验结果见表1,由表1可见,供试植物提取液在处理后24 h均表现出较强的拒食活性,拒食率达到56.7%~99.8%。其中胡椒的拒食作用最大,显著高于其他处理,浓度为40 mg/mL的处理效果最好,拒食率达99.8%;川楝子提取液20 mg/mL处理的效果最差,拒食率为56.7%;总体来看,各种植物提取液处理后24 h的拒食效果的优于48 h。 2.2 川吾子拒食率 试验结果见表2,由表2可知,3种供试植物丙酮提取物对菜青虫拒食率在70.1%~25.9%,拒食效果明显低于石油醚提取液(表2),其中,川楝子40 mg/mL处理后24 h的拒食效果最好拒食率为70.1%;胡椒5 mg/mL处理后48 h的拒食效果最差,仅为25.9%。 3 种植物提取物对菜青虫的拒食作用 3.1研究结果表明:胡椒、葱、川楝子3种植物的石油醚和丙酮提取物对菜青虫3龄幼虫均有一定拒食作用,5~40 mg/mL浓度处理24 h和48 h对菜青虫的拒食率达31.8%~99.8%。其中胡椒的石油醚的提取物拒食作用最大,40 mg/mL浓度处理的拒食率达99.8%。总体上看,3种供试植物的石油醚提取物拒食作用大于丙酮提取物,24 h的拒食作用效果优于48 h。 3.2本文在前期广泛筛选的基础上,进一步测定了胡椒、葱、川楝子3种植物提取物对菜青虫的拒食作用,但产生拒食作用的次生物质种类及作用机理有待进一步研究。从现有文献看,对川楝素的研究较多,且楝素作为一种植物源农药已商品化。从本文的研究结果看,胡椒石油醚提取物对菜青虫的拒食作用远大于川楝子,因此具有很好的开发利用前景。