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- 2023-11-30 发布于上海
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离子交换填料的选择、处理和保存
离子交换填料的选择
离子交换填料的种类很多,离子交换层析要取得较好的效果首先要选择合适的离子交换填料。
首先是对离子交换填料电荷基团的选择,确定是选择阳离子交换填料还是选择阴离子交换填料。这要取决于被分离的物质在其稳定的pH 下所带的电荷,如果带正电,则选择阳离子交换填料;如带负电,则选择阴离子交换填料。例如待分离的蛋白等电点为 4,稳定的pH 范围为 6-9,由于这时蛋白带负电,故应选择阴离子交换填料进行分离。强酸或强碱型离子交换填料适用的 pH 范围广,常用于分离一些小分子物质或在极端 pH 下的分离。由于弱酸型或弱碱型离子交换填料不易使蛋白质失活,故一般分离蛋白质等大分子物质常用弱酸型或弱碱型离子交换填料。
其次是对离子交换填料基质的选择。前面已经介绍了,聚苯乙烯离子交换填料等疏水性较强 的离子交换填料一般常用于分离小分子物质,如无机离子、氨基酸、核苷酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换填料亲水性较强,适合于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素 离子交换填料价格较低,但分辨率和稳定性都较低,适于初步分离和大量制备。葡聚糖离子 交换填料的分辨率和价格适中,但受外界影响较大,体积可能随离子强度和 pH 变化有较大改变,影响分辨率。琼脂糖离子交换填料机械稳定性较好,分辨率也较高,但价格较贵。
另外离子交换填料颗粒大小也会影响分离的效果。离子
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