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肉蓉抗小鼠阳虚小鼠抗疲劳作用的实验研究 在繁忙的社会活动中，人们长期以来一直处于高度紧张和疲劳的状态。此外，还有慢性消耗性疾病等因素，这导致身体系统和肠道功能障碍和疲劳。目前我国对抗疲劳药物的研究较为广泛。肉苁蓉为列当科一年生草本植物肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma 带鳞叶的肉质茎, 具有补肾阳, 益精血, 润肠通便之功效。本文采用氢化可的松造成小鼠阳虚模型, 研究肉苁蓉对阳虚模型小鼠的影响。 1 肉莎药物 1.1 药品与试剂 肉苁蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma, 生品, 购于北京崇光饮片厂, 产地内蒙古。取肉苁蓉500 g, 加10倍量的水, 开始煎煮。第1次1 h, 第2次0.5 h, 第3次0.5 h。合并煎液, 过滤蒸发浓缩, 然后放入烘箱烘干成粉末。 最终1 g肉苁蓉粉末相当于原药材2.67 g。 全血乳酸试剂盒 (南京建成生物工程研究所, 批号 ;尿素氮试剂盒 (南京建成生物工程研究所, 批号 ;环磷酰胺 (上海华联制药有限公司, 批号:031205) 。 1.2 仪器 UV757CRT紫外可见分光光度计, 上海精密科学仪器有限公司。小鼠自主活动仪, 中国医学科学院与中国航天医学工程研究所联合研制。 1.3 实验动物 KM种小鼠, 雌雄各半, 体重 (22±2) g, 由中国医学科学院动物中心提供, 合格证号:SCXK (京) 2004-0001。 2 小鼠单次给药和小鼠多次游泳实验 2.1 分组与造模 小鼠自然饲养3～4 d, 随机分成5组: (1) 正常对照组, (2) 阳虚模型组, (3) 肉苁蓉水煎液低剂量组2.5 g/kg (按生药量计) , (4) 肉苁蓉水煎液中剂量组5 g/kg, (5) 肉苁蓉水煎液高剂量组10 g/kg, 每组10只。除正常对照组外, 其余4组小鼠皮下注射氢化可的松25 mg/kg, 连续注射8 d, 给药组按给药剂量连续灌胃10 d, 每天1次, 正常对照组和模型组则灌胃给予相等体积的生理盐水。 2.2 自主活动实验 末次给药后30 min, 测定5 min内小鼠自主活动次数。 2.3 小鼠负重游泳实验 末次给药后30 min后, 鼠尾根部负荷6%体重的铅丝, 置于游泳箱中游泳 (水深35 cm, 水温25 ℃) , 记录小鼠自游泳开始至死亡的时间。以小鼠10 s内无法再浮出水面为依据, 来判断动物死亡。 2.4 血乳酸 (LAC) 的测定 末次给药30 min后小鼠尾部负重 (体重4%) , 然后将其放入水深35 cm, 水温 (30±0.5) ℃游泳箱中游泳10 min。休息15 min后, 用毛细玻璃管眼球采血20 μl, 用全血乳酸测定试剂盒进行血乳酸测定。 2.5 血尿素氮 (BUN) 的测定 末次给药30 min后, 将小鼠放入水深35 cm, 水温 (30±0.5) ℃游泳箱中不负重游泳90 min, 休息60 min后, 拔眼球采血0.5 ml (不加抗凝剂) , 依照血清尿氮素试剂盒说明书操作。于520 nm下, 30 min内测定各管吸收度, 换算为血尿素氮含量, 依照试剂盒说明书操作测定BUN含量。 3 肉纤维在小鼠游泳和健身中的应用 阳虚模型小鼠活动减少、反应迟钝、体毛枯疏无光泽。正常对照组和给药组小鼠活动灵活, 皮毛光泽。 肉苁蓉水煎液对阳虚小鼠体重的影响, 实验前随机分组, 各组与造模组体重比较无差异。给药后, 与正常组比较, 模型组小鼠体重明显下降 (P0.001) , 与模型组比较, 高剂量组动物的体重有显著性增加 (P0.05) 。 (见表1) 实验结果如表2所示, 肉苁蓉水煎液可以抵抗氢化可的松所致的小鼠精神萎靡现象, 使阳虚小鼠自主活动次数显著增加并恢复至接近正常水平, 高剂量组与模型对照组比较, 差异有统计学意义 (P0.05) 。 (见表2) 游泳实验结果如表3所示。阳虚小鼠体质下降, 耐力减弱, 与正常对照组比较, 游泳时间明显缩短 (P0.05) 。肉苁蓉水煎液高剂量组可明显延长阳虚小鼠的游泳时间 (P0.05) , 表现出增强耐力的作用。 (见表3) LAC是评价剧烈运动时机体疲劳程度最常用的生化指标。肉苁蓉水煎液对小鼠负重4%游泳10 min, 休息15 min后LAC的影响如表4所示, 与正常组对比, 阳虚小鼠在游泳后LAC显著性增加 (P0.01) 。与模型组比较, 肉苁蓉水煎液高剂量组能明显降低阳虚小鼠运动后的LAC (P0.05) 。 (见表4) BUN与机体机能、疲劳程度以及负荷量的大小呈密切正相关, 因此可作评定运动量的指标。肉苁蓉水煎液对小鼠不负重游泳90 min, 休息60 min后BUN的影响如表5所示, 与正常