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蟾酥抗肿瘤活性研究进展

中医药及其合法成分具有广药源广、价格低廉、应用历史悠久等优点，成为肿瘤药物研究的热点。本文运用现代药物作用机研究和解释中医肿瘤的作用，提取或提取中药中的各种活性成分，引导中国中医肿瘤研究领域的发展。

蟾酥是我国传统中药,为蟾蜍科动物中华大蟾蜍或黑眶蟾蜍的耳后腺及皮肤腺分泌的白色浆液,经炮制加工而制成;含有多种化学成分,具有强心、升压、镇痛、抗肿瘤等多种药理活性。目前,其抗肿瘤作用引起了肿瘤的广泛关注。学者研究表明,含蟾酥成份的中药复方制剂治疗肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、直肠癌及白血病等的临床观察显示,其有效率在26.13%-69.10%。

1毒配基类化合物

蟾酥所含成分比较复杂,通过对蟾酥的分离和鉴定,目前已确定的其主要化学成分为以下几类。

①蟾蜍毒素(BTXs),经水解可得到20余种蟾毒配基类(BGs)如有脂蟾毒配基(RBG)、华蟾毒配基(CBG)、羟基华蟾毒配基、远华蟾毒配基(TCBG)、华蟾毒灵(CBL)、蟾毒灵(BL)、蟾毒素、日蟾毒素、日蟾蜍毒配基、蟾毒它里宁,蟾毒它里定、蟾毒它宁及南美蟾毒精,等等。

②新发现的五种,包括20,21-环氧蟾毒内酯类:20S,21-环氧脂蟾毒配基;20R,21-环氧脂蟾毒配基;3-0-甲羧基-20S,21-环氧脂蟾毒配基;3-0-甲羧基-20R,21-环氧脂蟾毒配基;3-0-20S,21-环氧脂蟾毒配基。

③吲哚类衍生物有蟾酥碱(蟾蜍色胺)、蟾酥甲碱(蟾酥季胺)等。

④其它,5-羟色胺、肾上腺素等。

蟾毒配基类化合物是蟾酥中的主要化学物质,包括脂蟾毒配基(resibufogenin)、华蟾毒配基(cinobufagin)、蟾蜍灵(bufalin)等。已有的研究结果表明,上述成分是蟾酥抗肿瘤的主要活性成分。

2灿松与肿瘤的联合作用和机制

2.1主要作用于s期癌细胞增殖

研究表明,蟾酥及其抗癌活性成分具有抑制肿瘤细胞生长或直接杀伤作用、其中蟾蜍灵(BL)、华蟾毒精(CBG)、脂蟾毒配基(RBG)等是从蟾酥中分离出的抗癌有效单体。

蟾毒灵(Bufalin,BL)是从蟾酥中分离提取的抗癌有效单体成分之一,属蟾毒配基类。近年来研究表明,蟾毒灵对人红细胞膜Na+-K+-ATP酶有强烈抑制作用,显著的抑制肿瘤生长,能促进荷瘤动物细胞免疫功能,与化疗药物环磷酰胺/丝裂霉素C等可起协同作用,能升高白细胞,有放射防护作用等。

杨敏利用MTT比色法和以流式细胞仪检测细胞周期等实验方法,观察研究蟾蜍灵抑制人白血病HL-60细胞的作用。结果显示:蟾蜍灵可抑制HL-60细胞的增殖,其半数抑制浓度约为0.03/μmol/L,随蟾蜍灵浓度增加,抑制程度增加;实验结果证明:蟾蜍灵具有抑制HL-60细胞的增殖作用。

经对0.10μmol/L蟾蜍灵处理6h的HL-60细胞观察,G1期细胞小幅度下降,而S期细胞有所增高;持续作用12h,S期细胞增殖停止;作用24h,G0/G1峰显著,而S期的细胞持续下降,说明蟾蜍灵主要作用于S期细胞。

陈小义等在研究BL对胃癌MGC-803细胞的作用中发现:一定浓度的BL与低分化胃癌细胞系MGC-803作用48小时以上,即可显著抑制细胞生长,并随着药物浓度的增加,抑制率增大。实验测得的IC50约为0.1μmoL/L。结果显示,经BL处理过的胃癌MGC-803细胞,细胞核染色质凝集碎裂、DNA损伤、胞浆RNA含量下降,最终导致细胞死亡。经流式细胞技术等证实,凋亡主要发生在G0/G1期。

华蟾毒精(CBG)是从传统中药蟾酥中分离出来的具有抗癌活性的一种有效单体,为一种甾体类单体化和物。王鹂等采用SRB、MTT及流式细胞仪法等技术,观察CBG分别作用于人肝癌BeL-7402细胞、宫颈癌HeLe细胞、乳腺癌MCF-7细胞、胃癌BGC-823细胞和白血病HL-60细胞等,结果显示,CBG对人体肿瘤细胞的增殖都有明显的抑制作用。其BeL-7402,HeLe,MCF-7,BGC-823和HL-60细胞的IC50值分别为0.011、0.019、0.116、0.149、1.369μmol/L,其中以人宫颈癌细胞和人肝癌细胞最为敏感。流式方法测定的结果显示,不同浓度的CBG与HeLe细胞作用72小时,可使G2/M期的HeLe细胞由17.3%增加到35.6%。双向电泳的结果显示,0.02μmol/LCBG作用48h后,与对照组相比较HeLe细胞中相对分子质量较小(约30000-90000)的偏酸性蛋白(PH4-6)发生了较大的改变。因此证明