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微生物培养基;培养基:是指一切可供微生物细胞生长繁殖和合成各种代谢产物营养物质。
碳源、氮源、无机盐、微量元素、水、生长辅助因子;培养基;3.1培养基基础要求;3.2培养基成份及起源;一、碳源;常见碳源:;1、糖类;葡萄糖
?最易利用,几乎全部微生物都能利用
?葡萄糖常作为培养基一个主要成份,而且作为加速微生物生长一个有效糖。
?但过多葡萄糖会过分加速菌体呼吸,以至培养基中溶解氧不能满足需要,使一些中间代谢物(如丙酮酸、乳酸、乙酸等)不能完全氧化而积累在菌体或培养基中,造成pH下降,影响一些酶活性,从而抑制微生物生长和产物合成。;糖蜜
?制糖结晶母液,它是制糖工业副产物;
?含有丰富糖、氮类化合物、无机盐和维生素等,是微生物发酵培养基价廉物美碳源;
?糖蜜主要含有蔗糖,总糖可达50%-75%。
?糖蜜分甘蔗糖蜜和甜菜糖蜜,二者在糖含量和无机盐含量上有所不一样,即使同一个糖蜜因为加工方法不一样其成份也存在差异,所以使用时要注意。;淀粉糊精
?多糖,也是常见碳源;
?需经胞外酶水解成单糖后再被吸收利用;
?使用淀粉可克服葡萄糖代谢过快弊病,价格也比较低廉,在发酵工业中被普遍使用。
?常见淀粉为玉米、甘薯、马铃薯、木薯淀粉。;?油和脂肪也能被许多微生物作为碳源和能源
?这些微生物都含有比较活跃脂肪酶,在脂肪酶作用下,油或脂肪被水解为甘油和脂肪酸,在溶解氧参加下,深入氧化成CO2和H2O,并释放出大量能量。
?当微生物利用脂肪作为碳源时,要供给比糖代谢更多氧,不然大量脂肪酸和代谢中有机酸会积累,从而引发pH下降,并影响微生物酶系统作用。
?常见豆油、菜油、葵花籽油、猪油、鱼油、棉籽油等;?一些微生物对各种有机酸(如乳酸、柠檬酸、乙酸等)有很强氧化能力,能够有机酸或有机酸盐作为碳源。
?有机酸利用常会使pH上升,尤其是有机酸盐氧化时,常伴伴随碱性物质产生,使pH深入上升。
如以醋酸盐为碳源时,反应以下:
CH3COONa+2O2?2CO2+H2O+NaOH;?伴随石油工业发展,微生物工业碳源也有所扩充。
?正烷烃(普通指从石油裂解中得到14-18碳直链烷烃混合物)已用于有机酸、氨基酸、维生素、抗生素和酶制剂工业发酵中。
?石油工业发展促使乙醇产量增加,乙醇代粮发酵工艺发展也十分快速,自然界中能同化乙醇微生物和能同化糖质微生物一样普遍,种类也相当多,乙醇作碳源其菌体得率比葡萄糖作碳源还高,因而乙醇已成功地应用于发酵工业许多领域中,如利用乙醇生产单细胞蛋白;二、氮源;无机氮源和尿素、玉米浆等可被快速利用,为速效氮;
蛋白质氮则需先水解成肽和氨基酸后才能被吸收利用,
属迟效氮;?氮源物质常对培养液pH产生影响
(NH4)SO4?2NH3+H2SO4
NaNO3+4H2?NH3+2H2O+NaOH
反应中所产生NH3被菌体作为氮源利用后,培养液中就留下了酸性或碱性物质。
?在常见无机氮中,硫酸铵被菌体利用后会使培养液pH下降,为生理酸性物质;
硝酸钠被同化时则引发培养液pH上升,为生理碱性物质;;B、使用时注意盐形式(pH改变);四、生长因子;不是全部微生物都必需,只是对于一些自己不能合成这些成份微生物才是必不可少营养物质。;提供生长因子农副产品原料;五、水;?对于发酵工厂来说,恒定水源是至关主要,因为在不一样水源中存在各种原因对微生物发酵代谢影响甚大,尤其是水中矿物质组成对酿酒工业和淀粉糖化影响甚大。
?水源质量主要参数包含pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。;六、前体(precursor);发觉:
?最早是从青霉素生产中被发觉。
?加入玉米浆后,青霉素单位可从20U/ml增加到100U/ml;
?玉米浆中含有苯乙胺,它能被优先合成到青霉素分子中,从而提升青霉素G产量。;大多数前体,如苯乙酸对微生物生长有毒性,以及菌体含有将前体氧化分解能力,所以在生产中为了降低毒性和增加前体利用率,常采取少许屡次工艺。;产品;七、促进剂和抑制剂;?促进剂不是前体或营养物
?可影响正常代谢,或促进中间代谢产物积累,或提升次级代谢产物产量;2、抑制剂
抑制一些代谢路径进行,同时刺激另一代谢路径,以致能够改变微生物代谢路径。;产物;3.3发酵培养基类型;发酵培养基类型;1、按培养基物质起源;2、按培养基形态分;3.按用途分;供菌种繁殖孢子培养基,常见固体培养基。;孢子培养基基础要求:;常见孢子培养基:;2)种子培养基;?营养要求比较丰富和完全,氮源和维生素含量也要高些,但总浓度以略稀薄为好,这么可达较高溶解氧,供大量菌体生长和繁殖。;3)发酵培养基;;
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