农杆菌介导的RNAi抑制百合AG基因表达的研究的开题报告.docxVIP

农杆菌介导的RNAi抑制百合AG基因表达的研究的开题报告

摘要：

百合是一种重要的观赏花卉，其中AG基因在控制其花器官的发育中起着重要作用。本研究通过利用农杆菌介导的RNAi技术，抑制百合AG基因的表达，以探索其对花器官发育的影响。首先，利用PCR技术克隆AG基因的片段，并构建成RNAi载体。然后，通过农杆菌介导的转化方法将RNAi载体转化到百合的原生质体中。最后，通过RT-PCR和Westernblot等技术检测AG基因的表达。本研究的结果有望为深入理解百合花器官发育提供新思路。

引言：

AG基因是拟南芥中MADS-box转录因子家族中的一员，最早被发现是在花器官发育的最后阶段起调控作用。近年来，随着对AG基因及其同源基因在其他植物中富集的了解，AG基因被发现在控制花器官的诸多方面起着重要作用。在百合中，AG基因也被证实是控制花器官发育的重要因子。因此，抑制AG基因的表达可能会影响百合花器官的发育。

RNA干扰技术是一种重要的基因沉默技术，可以通过引入外源RNA分子来抑制靶基因的表达。本研究将利用农杆菌介导的RNAi技术，在百合中抑制AG基因的表达，以探究其对花器官发育的影响。

材料与方法：

1.克隆AG基因片段：通过PCR扩增出AG基因的片段，并在3末端连接HairpinRNA结构。

2.构建RNAi载体：将AG基因的HairpinRNA结构片段克隆入RNAi载体中。

3.细菌培养：选用抗生素敏感性较小的农杆菌株，进行培养。

4.农杆菌介导的转化：将RNAi载体转化到百合的原生质体中。

5.RT-PCR：利用cDNA合成和PCR技术，检测AG基因的表达情况。

6.Westernblot：通过Westernblot技术检测AG基因的蛋白表达情况。

预期结果：

本研究将通过农杆菌介导的RNAi技术，在百合中抑制AG基因的表达。通过RT-PCR和Westernblot等技术检测AG基因的表达，预计可以得到以下结果：

1.AG基因的表达会受到RNAi的抑制，呈现不同程度的下调。

2.AG基因的表达下调可能会影响百合花器官的发育，表现为花器官数量、大小和形态变化。

结论：

本研究将通过农杆菌介导的RNAi技术，抑制百合AG基因的表达，以探究其对花器官发育的影响。通过本研究可以为进一步深入理解百合花器官发育提供新思路。