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第1章发酵工程第3节发酵工程及其应用
微生物的选择培养和计数微生物的选择培养选择培养基科学实例筛选原因、思路、启示选择培养基的原理、概念、类型、举例选择培养基的作用微生物选择培养获取纯培养物的方法-稀释涂布平板法稀释涂布平板法的操作过程稀释涂布平板法的注意事项间接计数法—稀释涂布平板法直接计数—计数板计数法培养基的制备实验设计分析与评价微生物的数量测定土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(1)土壤取样(2)样品的稀释(3)稀释涂布平板法接种(4)微生物的培养与观察温故知新
从社会中来青霉素是世界上第一个应用于临床的抗生素。早期科学家只能从青霉菌中提取少量青霉素,它的价格贵如金。早期1瓶规格大概20万单位的青霉素最高卖到一根金条如今1瓶规格160万单位的青霉素注射剂一元那么,在工业上青霉素究竟是怎样生产的呢?
微生物纯培养技术的建立密闭式发酵罐的设计成功人们对发酵原理的认识发酵工程形成发酵工程的形成发酵工程:是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程基本环节是什么?
在青霉素生产过程中如果有杂菌污染,某些杂菌会分泌青霉素酶,将青霉素分解掉。生产柠檬酸生产啤酒生产青霉素生产味精黑曲霉啤酒酵母黄青霉谷氨酸棒状杆菌在菌种确定之后,要选择原料制备培养基。在生产实践中,培养基的配方要经过反复试验才能确定。接种选育菌种制备培养基扩大培养灭菌发酵罐内发酵分离、提纯产物获得产品性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。工业发酵罐的体积一般为几十到几百立方米,接入的菌种总体积需要几立方米到几十立方米。所以,在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养发酵工程中所用的菌种大多数是单一菌种,一旦有杂菌污染,可能导致产量大大下降。因此,培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。现代发酵工程使用的大型发酵罐均有计算机控制系统,能对发酵过程中的温度、pH、溶解氧、罐压、通气量、搅拌、泡沫和营养等进行监测和控制;还可以进行反馈控制,使发酵全过程处于最佳状态。电动机排气管pH计冷却水排出口冷却夹层发酵液搅拌叶轮生物传感器装置空气入口放料管阀门培养物或营养物质的加入口观察孔取样管温度传感器和控制装置冷却水进入口这是发酵工程的中心环节。在发酵过程中,要随时检测培养液中微生物的数量、产物的浓度等,以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分,要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成。如果发酵产品是微生物细胞本身,可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥,即可得到产品。如果产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。一、发酵工程的基本环节实例:谷氨酸的发酵生产:在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸;在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺
思考:扩大培养的目的是什么?怎样对菌种进行扩大培养?增加菌种数量。将培养到生长速度最快时期的菌体分开,再进行培养。思考:扩大培养所用的培养基,从性质上分类,是什么类型的培养基?液体培养基。可以使微生物与营养物质充分接触,提高营养物质的利用率,有利于微生物的繁殖。思考·讨论思考:引起发酵罐内培养液的温度和pH变化的原因有哪些?发酵工程中如何调节温度和pH?温度:原因:微生物分解有机物释放的能量,机械搅拌也会引起温度升高。方法:常用冷却水进行温度的调节pH:原因:培养基中营养成分的利用和代谢产物的积累。方法:是在培养基中添加缓冲液,在发酵过程中加酸或碱
?电动机?排气管⑦pH计?冷却水排出口冷却夹层发酵液?搅拌叶轮⑧生物传感器装置④空气入口②放料管③阀门①培养物或营养物质的加入口⑤观察孔⑥取样管⑨温度传感器和控制装置⑩冷却水进入口装置编号主要用途①②③控制培养物以一定速度进入、流出发酵罐,实现连续培养④控制溶解氧⑤⑥⑦⑧⑨通过肉眼观察、仪器检测等监控发酵条件以及发酵过程,⑥处抽取样品进一步检测⑩?通过控制冷水流速调节罐温?调节罐压??电机带动叶轮转动进行搅拌,使微生物与发酵液混合均匀,加快氧气溶解以及散热发酵罐示意图
讨论1:微生物菌种资源丰富,选择发酵工程用的菌种时需要考虑哪些因素?①在低成本的培养基上能迅速生长繁殖;②生产所需代谢物的产量高;③发酵条件容易控制;④菌种不易变异、退化等。讨论2:怎样对发酵条件进行调控以满足微生物的生长需要?要对温度、pH、溶解氧等发酵条件进行严格控制,使其最适合微生物的生长繁殖,同时及时添加必要的营养组分。思考·讨论发酵工程基本环节分析
讨论3:在产物分离和提纯方面,发酵工程与传统发酵技术相比有哪些改进之处?
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专注于中小学各科教学多年,曾获青年岗位能手荣誉称号; 教育局评为县级优秀教师; 2013在全省高中思想政治优秀设计评选活动中荣获一等奖; 在全市高中优质课大赛中荣获一等奖; 第十一届全国中青年教师(基教)优质课评选中荣获二等奖; 2017年4月全省中小学教学设计中被评为一等奖2018年被评为市级教学能手
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