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NY/T552—2002

流行性淋巴管炎诊断技术

1范围

本标准规定了流行性淋巴管炎的临床检查、脓汁显微镜检查及变态反应试验技术要求。

本标准适用于口岸、产地、集散地及饲养单位(或个人)的马(骡)的流行性淋巴管炎的诊断和检疫。

2临床检查

2.1检查前准备

术者及助手均穿全套工作服，术者戴医用胶皮手套。配制消毒药液(0.1%新洁尔灭或3%来苏儿)。由助手保定被检马(骡)。

2.2临床检查方法

先视诊被检动物体表有无结节、脓肿及溃疡，而后触摸颈部及胸部两侧，了解结节及脓肿的分布、大

小、性质以及浅表淋巴管肿胀情况。最后检查可视粘膜。

2.3病变特征

流行性淋巴管炎的特征性症状是在皮肤、皮下组织及黏膜上发生结节、脓肿和溃疡。皮下淋巴管发炎肿大，并有串珠状结节。非重症病马(骡),其体温、食欲及精神无明显变化。

2.3.1皮肤病变

最常发生于四肢、头部，颈部及胸侧的皮肤及皮下组织。初期结节小而扁平呈丘疹状，以后逐渐增至蚕豆大乃至鸡蛋大。初期硬固无痛，以后化脓形成脓肿，中心变软有波动，局部被毛脱落，最后破溃，流出黄色或黄绿色黏稠的脓汁，疡底形成平的溃疡，以后肉芽组织赘生，形成蘑菇状溃疡(溃疡面高于周围的皮肤)。溃疡不易愈合，并向周围扩散，或几个溃疡融合一起，形成一个大溃疡面。

2.3.2黏膜病变

全身性感染病例，可在鼻腔、口唇、眼结膜及阴道黏膜等处发生结节。结节的特征是扁平，呈不整圆形，高出黏膜表面，大小不等，呈黄白色，表面光滑干燥，边缘整齐，周围无红晕。结节化脓破溃后形成溃疡。病变发生于鼻腔时，则流出少量黏脓性鼻液。

2.3.3淋巴管炎病变

受侵害的淋巴管变粗变硬，如索状(索肿),并沿肿胀的淋巴管形成数个结节，呈串珠状排列(串珠状

结节),最终破溃形成蘑菇状溃疡。局部淋巴结肿大化脓。

2.4判定

具有2.3.1、2.3.2和2.3.3任何一项病变者，均应怀疑为流行性淋巴管炎病马(骡),并做脓汁显微镜检查或变态反应试验。

3脓汁显微镜检查

3.1材料准备

3.1.1器材

普通光学显微镜，载玻片，盖玻片，灭菌2mL～5mL注射器带16号针头，灭菌小试管，灭菌棉拭

子，灭菌移液管，10%氢氧化钠溶液或生理盐水。

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3.1.2采样

用注射器无菌采取脓肿内的脓汁，或用棉拭子采取溃疡面上的脓汁及脓痂，放入小试管，立即送实验室检查，或放4℃冰箱保存待检。

3.2操作方法

3.2.1压滴标本制备

用移液管吸取10%氢氧化钠液或生理盐水，滴一小滴(约0.025mL)于载玻片中央、而后用钩菌环取少量脓汁放于液滴内混匀，加上盖玻片，即成压滴标本。棉拭子采取的脓汁及脓痂可直接涂于载玻片上。再加10%氢氧化钠液一小滴，等脓痂变透明后，加上盖玻片。

3.2.2显微镜检查

将压滴标本放于载物台上，把显微镜的集光器下调，使进入物镜的光线弱一些。先以高倍镜头(扩大400倍～500倍)检查，后用油浸镜头检查。脓汁中流行性淋巴管炎囊球菌的典型形态为椭圆形(象西瓜

子)或圆形，具有双层菌膜，一端或两端尖锐，大小为3μm～4μm×2μm～3μm,内部为均质半透明状

态，内含2～4个折光性强的小颗粒，呈现回旋运动。菌体多单个存在，也有2～3个菌相连者，常常可在脓细胞内看到十几个菌体成堆存在。

3.3判定

3.3.1全面检查2个压滴标本，任何一个标本发现典型的流行性淋巴管炎囊球菌，则判为流行性淋巴

管炎脓汁检查阳性。

3.3.2二个压滴标本均未发现流行性淋巴管炎囊球菌，应再采样检查一次，如仍未发现囊球菌，则判为流行性淋巴管炎脓汁检查阴性。

4变态反应试验

4.1材料准备

4.1.1器材：灭菌1mL注射器及针头，游标卡尺，剪毛剪，75%酒精棉球或0.1%新洁尔灭棉球。

4.1.2变态反应原。

4.2操作方法

4.2.1剪毛

在被检马、骡左侧或右侧颈部中三分之一的中央部健康皮肤处剪毛，面积5cm×5cm。被毛尽量

剪短。

4.2.2测量皮肤皱褶厚度

在使用囊球菌素时，须在注射前将剪毛部位的皮肤用手指捏起，以游标卡尺测量皮肤皱褶的生理厚度(以mm表示),并记入登记表。登记表样式见附录A(资料性附录)。

4.2.3消毒及注射

用75%酒精棉球或0.1%新洁尔灭棉球消毒剪毛部位后，使用灭菌注射器皮内注射囊球菌素或浓缩囊球菌素，成年马(骡)0.3mL,两岁以内马(骡)0.2mL。注射后3天内，避免重度使役，防止磨擦注射部位。

4.2.4检查

在注射后第24h、48h、72h各检查一次。注射囊球菌素者，用游标尺测量注射部位皮肤的皱褶厚度(以mm表