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实验一光学显微镜的使用及显微绘图（3课时）

实验目的

在普通光学显微镜下识别细胞和细胞器的形态结构，掌握生物绘图的方法。

实验原理

细胞在形态上是多种多样的，有球形、椭圆形、扁平形、立方形、梭形、星形等。虽然细胞的形状各异，但是它们却有共同的基本结构特点，都由细胞膜（动物）、细胞壁（植物）、细胞质和细胞核组成。细胞中的各种细胞器，如线粒体、高尔基体、中心体、核仁、染色体等，一般经过一定固定染色处理后，大多数在光学显微镜下是可以看见的（图1）。细胞器的形态结构在普通光学显微镜下与电子显微镜下所看到的结构有很大的差别。

实验仪器、材料和试剂

1．仪器：复式显微镜、擦镜纸

2．材料：洋葱根尖切片、柿胚乳细胞、小白鼠肝切片、马蛔虫受精卵切片

方法与步骤

一、洋葱根尖切片细胞的观察

先用低倍镜观察根尖的纵切面，注意分生区、伸长区、成熟区细胞的异同，然后再仔细观察细胞的形态结构，特别注意细胞的形状、大小，以及细胞壁、细胞核、核仁、细胞质、液泡的形态结构。观察细胞有丝分裂不同阶段染色体的变化特点。

二、柿胚乳细胞示胞间连丝的观察

先在低倍镜下找到柿胚乳细胞，然后转用高倍镜观察，可看到细胞间丝状的联系。

三、小白鼠肝细胞切片糖原的观察

先用低倍镜后用高倍镜观察，可见到许多肝小叶，每小叶有许多紧密排列成索状的多角形的肝细胞，细胞中央有大而圆的细胞核。这时，转用油镜观察，可见到细胞质内分布着许多被染成深色的糖原颗粒。

四、马蛔虫受精卵切片中心体的观察

取马蛔虫受精卵切片，在显微镜下找到充满子宫腔的受精卵，每个马蛔虫受精卵外围有一层较厚的卵膜，膜内有宽大的围卵腔，各围卵腔内有处在不同分裂期的卵细胞。找到分裂中期的细胞，在细胞中央被染成蓝色条状或棒状的结构，这就是染色体。在染色体两侧可见各有一个较小的，亦被染成蓝色的小粒，称中心粒。在中心粒的周围可见呈放射状的星丝。

【作业】

1．画出柿胚乳细胞胞间连丝图，并标示出细胞的各部分。

2.绘制马蛔虫卵细胞中心体图，并标示出细胞的各部分。

实验二细胞膜的渗透性观察（3课时）

一、实验目的

1.了解细胞膜对物质通透性的一般规律。

2.了解溶血现象及其发生机制。

二、实验原理

细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。它是一种半透膜，可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的，水是生物界最普遍的溶剂，水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散，这种现象就是渗透。渗透作用是细胞膜的主要功能之一。将红细胞放在低渗盐溶液中，水分子大量渗到细胞内，可使细胞胀破，血红蛋白释放到介质中，由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液，这种现象称为溶血。将红细胞放在某些等渗盐溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，膜两侧的渗透压平衡会发生改变，也会发生溶血现象。因此，发生溶血现象所需时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验材料，将其放入不同的介质溶液中，观察红细胞的变化。

实验用品

（一）材料鸡血细胞

（二）器材普通显微镜、普通离心机、扭力天平、10ml试管、10ml刻度离心管、试管架，2ml注射器（无需针头）或5ml移液管、洗耳球、滴管、载玻片、擦镜纸、记号笔等。

（三）试剂

Alsever溶液

葡萄糖2.05g

柠檬酸钠(Na9C6H5O7.2H2O)0.89g

柠檬酸（C6H6O7.H2O）0.05g

氯化钠0.42g

蒸馏水100ml

调PH至7.2，过滤灭菌或高压灭菌10min，置4℃冰箱保存。

1．0.128mol/LNaCl溶液。

2.0.17mol/LNaCl溶液。

3．0.17mol/LNaNO3溶液

4．0.17mol/LNH4Cl溶液。

5.0.17mol/LNH4AC溶液。

6.0.32mol/L葡萄糖。

7.0.32mol/L甘油。

8.0.32mol/L甲醇。

9.0.32mol/L乙醇。

10.0.32mol/L丙醇。

11.0.32mol/L戊醇。

12.0.32mol/L丙酮。

13.0.32mol/L尿素。

实验步骤：

1．从集市买一只活鸡现杀取血5ml（防止污染），放入盛有20mlAlsever’s液瓶中，混匀后置冰箱保存备用（2周内使用）。

2.使用前，取用Alsever’s液保存的新鲜鸡血5ml，加入8ml的0.128mol/L的NaCl溶液，小心混匀，1000r/min离心5min，