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山东医药2012年第52卷第24期

维康颗粒对疲劳型亚健康大鼠

血浆蛋白谱的影响

李玉萍，孙晓敏，靳文。

(1南方医科大学中医药学院南方医科大学中西医结合医院，广州510515；

2广州市红十字会医院)

摘要：目的观察正常大鼠、疲劳型亚健康大鼠以及维康颗粒干预后疲劳型亚健康大鼠的血浆蛋白谱差异表

达。方法雄性大鼠24只，按体重进行随机化分正常对照组、模型组、维康颗粒高剂量组，各组大鼠血浆采用丙酮

沉淀进行血浆浓缩脱盐、蛋白定量和双向凝胶电泳。硝酸银染色法染色凝胶，Powerlookl100图像扫描仪扫描，二

维图谱分析软件PDQuest7．1．0进行图像分析差异表达蛋白质斑点的数据信息。结果2-DE图像进行定性定量

差异分析，模型组与正常组蛋白谱比较，有120个点有明显差异，有17个差异点经高剂量维康颗粒治疗后较模型

组有明显恢复。结论大鼠疲劳型亚健康的发生可能与维康颗粒高剂量组大鼠血浆较模型组有明显恢复表达的

17个蛋白质斑点相关。

关键词：疲劳型亚健康；大鼠模型；血浆蛋白谱；维康颗粒

中图分类号：R285文献标志码：A文章编号：1002—266X(2012)24-0032-03

随着社会的发展和生物医学模式的转变，自上像扫描仪为美国Umax公司生产，3K30低温高速离

世纪末，亚健康已越来越为国际医学界和社会所重心机、Diagnostics酶标仪为美国Sigma公司出品。

视。本课题组大规模亚健康流行病学调查显示亚健美国Bio—Rad公司PDQuest7．1．0图谱分析软件，脱

康的发生率较高，疲劳为亚健康状态的最主要表现色摇床等均为国产。

之一，疲劳型亚健康已成为亚健康的主要类型之一，1．1．4实验试剂IPGstrip(24cm，PH3-10NL)、UI—

严重地危害了人们的健康、工作及生活…。维康颗traurea(尿素)、Thiourea(硫脲)、IPGbuffer(pH3—

粒是我们根据中医药理论和多年临床实践研制出的10)、DTF(二硫苏糖醇)、CHAPS(丙基硫酸盐)购自美

治疗亚健康状态的中药复方。本研究通过观察维康国Amersham公司。Acrylamide(丙烯酰胺)、Methyle—

颗粒对疲劳型亚健康大鼠血浆蛋白谱的影响，为疲nebisacrylamide(甲叉双丙烯酰胺)、AgaroseM(琼脂

劳型亚健康的发生发展机制及防治研究提供依据。糖M)、Glycine(甘氨酸)、Ammoniumpersulfate(过硫

1材料与方法酸铵)、SDS(十二烷基磺酸钠)、Bromophenolbule(溴

1．1材料酚蓝)、Iodacetamide(碘乙酰胺)等为美国BBI公司产

1．1．1实验对象SPF级雄性Sprague．Dawley大品。Bradford蛋白定量试剂盒、无水碳酸钠、硫代硫

鼠(南方医科大学实验动物中心提供，合格证号：粤酸钠、三水合乙酸钠等均为国产试剂。

检证字第2006A051)24只，体质量(220±20)g。

1．2方法

1．1．2实验条件实验前全部大鼠适应性喂养3

1．2．1实验分组实验开始前3d，每天每只大鼠

d，室温22～26~C，相对湿度65％，明暗交替12h，所

负5％体质量学习游泳20rain。水深50cm，水温24

有大鼠分笼饲养，4只／笼，自由饮水，标准饲料自由

±2~C。禁食24h后称重，按照体质量随机分正常

采食。