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Tris-氯化铵红细胞裂解液

简介：

在生物科研领域，经常需要去除红细胞，去除红细胞的方法有多种，如ACK

LysisBuffer、Tris-氯化铵红细胞裂解液、GeysLysisBuffer。Tris-氯化铵红

细胞裂解液(Tris-

NH4ClRedBloodCellLysisBuffer)，也称为Tris-NH4ClLysis

Buffer，是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或血液中裂解并去除无

核红细胞的溶液，其主要有效成分为NH4Cl。

LeageneTris-NH4ClLysisBuffer经过优化配方，在裂解无核红细胞的同

时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除

菌，经过Tris-NH4ClLysisBuffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的

细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

组成：

编号

CS0006CS0006Storage

名称

Tris-NH4ClLysisBuffer100ml500ml4℃

使用说明书1份

自备材料：

1、胰蛋白酶

2、离心机

3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液

4、胎牛血清

操作步骤(仅供参考)：

(一)组织细胞样本的常规操作

1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方

法制备成细胞悬液，离心弃上清。

2、裂解:加入Tris-NH4ClLysisBuffer，轻柔吹打混匀，裂解。本操作步

骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。

3、离心，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3各一次。

5、洗涤：根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻

柔混匀重悬沉淀。离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、

HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、如有必要，重复上述步骤5一次，共洗涤1～2次。

7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。

(二)组织细胞样本的快速操作(无需洗涤)

1、制备细胞悬液：新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理，通过适当方

法制备成细胞悬液，离心弃上清。

2、裂解：加入Tris-NH4ClLysisBuffer，轻柔吹打混匀，裂解。本操作步

骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。

3、加入PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻柔混匀。

4、离心，弃红色上清，本离心步骤亦可在室温下操作。

5、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2～4各一次。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。

(三)血液样本的常规操作

1、取新鲜抗凝血，离心，弃上清。

2、裂解:加入Tris-NH4ClLysisBuffer，轻柔吹打混匀，裂解。本操作

步骤在4℃条件下操作更佳，亦可在室温下操作。(特别提醒：对于鼠的血液，裂

解已经足够，对于人的外周血，宜延长裂解时间，并且裂解过程中轻轻摇动以促进

红细胞裂解。)

3、离心，弃红色上清。如无低温离心机，本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全，可以重复上述步骤2和步骤3一次。

5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液，轻

柔混匀重悬沉淀。离心，弃上清，该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、

HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀，进行计数、培养等后续实验。

注意：对于微量或少量的血液样