SCT7202.2-2007 斑节对虾杆状病毒诊断规程 第2部分：PCR检测法-.pdf

ICS65.020.30

B41

中华人民共和国水产行业标准

SC/T7202.2-2007

斑节对虾杆状病毒病诊断规程

第2部分：PCR检测法

DiagnosticProtocolsforPenaeusmonodon-TypeBaculovirus(MBV)

ofPenaeidShrimp--…

Part2:PCRMethod

2007-06-14发布2007-09-01实施

中华人民共和国农业部发布

一一一一－一一一一一一一一

SCIT7202.2-2007

前

SCIT7202《斑节对虾杆状病毒病诊断规程》分为三个部分：

－－第1部分：压片显微镜检查法：

一一第2部分：PCR检测法；

一一第3部分：组织病理学诊断法o

本部分为纪IT7202的第2部分。

本部分的附录A和附录B为规范性附录，附录C为资料性附录。

本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出。

本部分由全国水产标准化技术委员会归口。

本部分起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站。

本部分主要起草人：黄健、杨冰、陈爱平、宋晓玲、史成银、杨丛海、魏琦。

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SCIT7202.2-2007

斑节对虾杆状病毒病诊断规程

第2部分：PCR检测法

1警告一使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问题。

使用者有责任采取适当的安全和健靡措施，并保证符合国东有关法规规定的条件。

2范围

SCIT7202的本部分规定了斑节对虾杆状病毒病PCR检测法的原理、试剂与材料、仪器设备、操作

步骤和结果判定。

本部分适用于进行病原筛查和疾病的确诊。其中核型多角体基因保守序列法仅适用于对虾，包括

对虾活体、粪便，以及冰冻和冰鲜虾产品的MBV的筛查和疾病的初步诊断。单独使用时不适于对病毒

量或感染活性的估测以及宿主感染程度的评估。

3规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有

的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究

是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

SCIT7202.1-2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程第1部分：压片显微镜检查法

SCIT7202.3-2007斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法

4原理

4.1斑节对虾杆状病毒病的病原和病理学特征

见SCIT7202.3-2007（斑节对虾杆状病毒病诊断规程第3部分：组织病理学诊断法）中3.1的

规定。

4.2技术原理

聚合酶链式反应（polymerasechainreaction,PCR）是以待测样品的一段DNA作为模板，以与模板两

端序列互补的一对特异性寡核昔酸序列作为引物，在四种脱氧核糖核背三磷酸存在下，利用依赖DNA

的DNA聚合酶的合成作用。经过数十次变性、退火和延伸的反应循环，使模板上介于两个引物之间的

DNA片段得到特异性地级数扩增，再通过电泳等手段检测到被特异性扩增的片段，从而可揭示微量病

毒DNA的存在。套式PCR是在第一步PCR扩增的产物内，再用一对引物进行第二步PCR扩增。

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