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2024年7月

附件：1143细菌内毒素检查法公示稿（第三次）

11143细菌内毒素检查法

2本法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供

3试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。

4细菌内毒素检查包括两种方法，即凝胶法和光度测定法，后者包括浊度法和

5显色基质法。可采用凝胶检测和光度检测技术，共包括以下六种方法：凝胶限度

6法（方法1）、凝胶定量法（方法2）、动态浊度法（方法3）、终点浊度法（方法

74）、动态显色法（方法5）、终点显色法（方法6）。供试品检测时，可使用其中

8任何一种方法进行试验。当测定结果有争议时，除另有规定外，以凝胶限度法结

9果为准。

10本试验操作过程应防止内毒素的污染。

11细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示，1EU与1个内毒素国际单位（IU）

12相当。

13细菌内毒素国家标准品系自大肠埃希菌提取精制，并以细菌内毒素国际标准

14品标定其效价，用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度、标定细菌内毒素工作标准

15品的效价，干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度

16复核试验、光度测定法中标准曲线可靠性试验。

17细菌内毒素工作标准品系以细菌内毒素国家标准品为基准标定其效价，用于

18干扰试验及检查法中编号B和C溶液的制备、凝胶法中鲎试剂灵敏度复核试验、

19光度测定法中标准曲线可靠性试验。

20细菌内毒素检查用水应符合灭菌注射用水标准，其内毒素含量小于

210.015EU/ml（用于凝胶法检测技术）或小于0.005EU/ml（用于光度法检测技术）,

22且对内毒素检查法试验无干扰作用。

23鲎试剂是从鲎的血液变形细胞中提取制备中提取出的冻干试剂，可以与细菌

24内毒素发生凝集反应。除了内毒素，鲎试剂还与某些β-葡聚糖反应，产生假阳

25性结果。如遇含有β-葡聚糖的样品，可使用去G因子鲎试剂或G因子反应抑制

26剂来排除鲎试剂与β-葡聚糖的反应。

27试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。耐热器皿常用

28干热灭菌法（250℃、至少30分钟）去除，也可采用其他确证不干扰细菌内毒素

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29检查的适宜方法。若使用塑料器具，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应

30选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器具。

31供试品溶液的制备某些供试品一般采用溶解和（或）稀释等适宜方法或在

32水性溶液中浸提制成供试品溶液。必要时，可调节被测溶液（或其稀释液）的

33pH值，一般供试品溶液和鲎试剂混合后溶液的pH值在6.0～8.0的范围内为宜，

34可使用适宜的酸、碱溶液或缓冲液调节pH值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查

35用水在已去除内毒素的容器中配制。所用溶剂、酸碱溶液及缓冲液应未检测出内

36毒素和不含内毒素和干扰因子。

37内毒素限值的确定药品、生物制品的细菌内毒素限值（L）一般按以下公

38式确定：

39L=K/M

40式中L为供试品的细菌内毒素限值，一般以EU/ml、EU/mg或EU/U（活性单位）

41表示；

42K为人每千克体重或每平方米体表面积每小时最大可接受的内毒素剂量，

43以EU/（kg·h）表示，注射剂K=5EU/（kg·h），放射性药品注射剂K=2.5EU/

注1

44（kg·h），鞘内用注射剂K=0.2EU/（kg·h），按体表面积给药时K=100EU/

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