药物的含量测定.ppt

吸收系数%1110cmEM·=e摩尔吸收系数(ε)溶液浓度液层厚度百分吸收系数溶液浓度液层厚度第30页，共73页，星期日，2025年，2月5日2.仪器的基本结构钨灯（6～12V），产生320～3200nm的连续光谱，其适宜的波长是360～1000nm。氢灯发射150～400nm波长的光，适用于200～400nm波长。光源单色器吸收池检测器数据记录处理第31页，共73页，星期日，2025年，2月5日（2）吸收度的准确度吸收度的准确性用基准重铬酸钾硫酸溶液检定60mgk2Cr2O7,释稀1000ml，在规定波长处测定吸收度，计算吸收系数E，相对误差度在±1%以内。（3）分辨率测定波长(nm)235(min)257(max)235(min)235(max)吸收系数-E124.5144.048.6106.6（1）波长的准确度3.仪器的校正和检定第32页，共73页，星期日，2025年，2月5日《中国药典》2010版对吸光度的测定做了以下要求：（1）溶剂：要求：能溶解样品，挥发性小，对光波吸收少。溶剂吸收度（以空气为空白）在220-240nmA＜0.4在241-250nmA＜0.20在251-300nmA＜0.1300nm以上A＜0.054.吸光度的测定第33页，共73页，星期日，2025年，2月5日（2）空白试验校正：采用空白对照，将溶剂装入吸收池，放入光路调节，仪器使吸收度为0（或透光率100%），然后再测样品。（3）测定波长的核对：为了提高测定灵敏度，减少测定误差，吸收度一般应在测定，测定样品的与文献记载对照，应在规定波长±2nm以内。（4）供试品溶液的浓度：为了减少误差，应考虑使吸光度在0.3～0.7范围内第34页，共73页，星期日，2025年，2月5日（１）对照品比较法：（２）吸收系数法：（３）标准曲线法：5.含量测定：第35页，共73页，星期日，2025年，2月5日(1)对照法供试品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度供试品溶液的浓度对照品溶液的浓度第36页，共73页，星期日，2025年，2月5日(2)吸收系数法计算第37页，共73页，星期日，2025年，2月5日(3)标准曲线法配制系列浓度的对照品溶液，在λmax处测吸收度A，做吸光度—浓度曲线，测试样品时，根据A在标准工作曲线上查C。第38页，共73页，星期日，2025年，2月5日（1）空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊。如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液。（2）测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池。（3）在测定时或改测其它检品时，应用待测溶液冲洗吸收池3～4次，用干净绸布或擦镜纸擦净吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨损），放入样品室每次方向应一致。（4）取吸收池时，应拿毛玻璃两面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及时用测定溶剂冲净，再用纯化水冲净，用干净绸布或擦镜纸擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防尘保存。若吸收池内外壁沾污，用脱脂棉缠在细玻璃棒上蘸上乙醇，轻轻擦试，再用纯化水冲净。（5）仪器经过搬动请及时检查并纠正波长精度，并应经常校准波长精度。6.注意事项第39页，共73页，星期日，2025年，2月5日特点：灵敏度高，可达10-10～10-12g/ml要求低浓度下测定须做空白测定荧光弱的药物可衍生化后测定二、荧光分析法第40页，共73页，星期日，2025年，2月5日第四节色谱分析法色谱法：是一种物理或物理化学分离分析方法。分离机制：分配、吸附、离子交换、分子排阻及亲合色谱法优点：高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快、应用范围广。应用：各国药典中广泛用作纯度检查、含量测定。分类：流动相：气体→气相色谱法液体→液相色谱法固定相：固体或液体气－固色谱法；气－液色谱法；液－固色谱法；液－液色谱法操作形式：柱色谱法、平板色谱法、电泳法第41页，共73页，星期日，2025年，2月5日一、HPLC色谱法及定量方法（一）主要参数：1.基线：没有样品进入检测器时，噪音随时间的变化。2.保留时间tR：从进样到组分色谱峰顶点的时间进样tRh0.5hWh/2Wt第42页，共73页，星期日，2025年，2月5日