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考点规范练34基因工程
1.编码蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五个片段组成,编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成,如图1所示。
图1
图2
回答下列问题。
(1)现要通过基因工程的方法获得蛋白乙,若在启动子的下游干脆接上编码蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT……CAGGAAGGA),则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙,缘由是?。?
(2)某同学在用PCR技术获得DNA片段B或D的过程中,在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等,还加入了序列甲作为,加入了作为合成DNA的原料。?
(3)现通过基因工程的方法获得了甲、乙、丙三种蛋白,要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用,某同学做了如下试验:将肯定量的含T淋巴细胞的培育液平均分成四组,其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一组作为比照,培育并定期检测T淋巴细胞浓度,结果如图2。
①由图2可知:当细胞浓度达到a时,添加蛋白乙的培育液中T淋巴细胞浓度不再增加,此时若要使T淋巴细胞接着增殖,可采纳的方法是。细胞培育过程中,培育箱中通常要维持肯定的CO2浓度,CO2的作用是。?
②仅依据图1、图2可知,上述甲、乙、丙三种蛋白中,若缺少(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所编码的肽段,会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。?
答案:(1)编码乙的DNA序列起始端无ATG,转录出的mRNA无起始密码子
(2)模板dNTP
(3)①进行细胞传代培育维持培育液的pH②C
解析:(1)由基因乙的碱基序列可知,由该序列转录出的mRNA无起始密码子,所以在启动子的下游干脆接上编码蛋白乙的DNA序列后,所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙。(2)PCR反应体系中除了加入DNA聚合酶、引物等,还应加入序列甲作为模板,加入四种脱氧核苷酸(dNTP)作为合成DNA的原料。(3)当细胞浓度达到a时,T淋巴细胞的浓度不再增加,是因为出现了接触抑制现象,所以可以进行细胞传代培育,使T淋巴细胞接着增殖;细胞培育过程中,培育箱中通常要维持肯定的CO2浓度,CO2的作用是维持培育液中的pH。依据图2可知,甲、乙两组的T淋巴细胞数量多,丙组的T淋巴细胞数量少,依据图1比较可知,丙组T淋巴细胞少的缘由是蛋白丙缺少C片段所编码的肽段。
2.科研人员从耐盐植物中获得了耐盐基因,利用转基因技术将耐盐基因转入水稻细胞中培育出了耐盐水稻新品系。下图表示构建耐盐基因表达载体的过程。请回答下列问题。
(1)据图分析可知,在构建的耐盐基因表达载体中,图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、,其中启动子的功能是?。?
(2)据图分析可知,在构建耐盐基因表达载体时,须要用对质粒进行切割,从而保证。?
(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞,依据农杆菌的感染特点,将耐盐基因插入T质粒的上,经过转化作用进入水稻细胞,并将其插入上,从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。?
(4)检测转基因水稻是否培育胜利可运用的最简便的方法是。
答案:(1)标记基因和终止子作为RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动目的基因转录
(2)HindⅢ和XbaⅠ耐盐基因与质粒正确连接
(3)T-DNA水稻细胞染色体DNA
(4)将其种植在盐碱地上
解析:(1)在构建的耐盐基因表达载体中,题图中未标注出的必需元件有耐盐基因启动子、标记基因和终止子,其中启动子作为RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动目的基因转录。(2)据图分析可知,在构建耐盐基因表达载体时,须要用HindⅢ、XbaⅠ对质粒进行切割,由于两个酶切位点产生的黏性末端不同,可以避开自身环化,从而保证耐盐基因与质粒正确连接。(3)常用农杆菌转化法将耐盐基因导入水稻受体细胞,依据农杆菌的感染特点,将耐盐基因插入T质粒的T-DNA上,T-DNA可以携带目的基因转移至受体细胞的染色体DNA上,从而使其遗传特性得以稳定维持和表达。(4)可从分子水平和个体水平检测转基因水稻是否培育胜利,其中最简便的方法是进行个体水平的检测,即将转基因水稻种植在盐碱地上。
3.发根农杆菌Ri质粒是一种自然存在的植物遗传转化系统。Ri质粒有3个功能区:①T-DNA区是Ri质粒上唯一整合到植物基因组的DNA片段;②Vir毒性蛋白区是发根农杆菌实现高效侵染所必需的区域;③Ori区即复制起始区与功能代谢区。常用的质粒载体pCAMBIA1301可以分别在大肠杆菌以及发根农杆菌中进
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