食品安全标准28天经口毒性试验.docx

中华人民共和国国家标准

GB15193．22—2014

2014-12-01发布

食品安全国家标准28天经口毒性试验

(报批稿)

2015-05-01实施

中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

发布

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GB15193．22—2014

食品安全国家标准

28天经口毒性试验

1范围

本标准规定了实验动物28天经口毒性试验的基本试验方法和技术要求。

本标准适用于评价受试物的短期毒性作用。

2术语和定义

2．1重复剂量28天经口毒性

实验动物连续28天经口接触受试物后引起的健康损害效应。

2．2未观察到有害作用剂量

通过动物试验，以现有的技术手段和检测指标未观察到任何与受试物有关的毒性作用的最大剂量。

2．3最小观察到有害作用剂量

在规定的条件下，受试物引起实验动物组织形态、功能、生长发育等有害效应的最小作用剂量。

2．4靶器官

实验动物出现由受试物引起明显毒性作用的器官。

2．5卫星组

在毒性研究设计和实施中外加的动物组，其处理和饲养条件与主要研究的动物相似，用于试验中期或试验结束恢复期观察和检测，也可用于不包括在主要研究内的其他指标及参数的观察和检测。

3试验目的和原理

确定在28天内经口连续接触受试物后引起的毒性效应，了解受试物剂量-反应关系和毒作用靶器官，确定28天经口最小观察到有害作用剂量(LOAEL)和未观察到有害作用剂量(NOAEL)，初步评价受试物经口的安全性，并为下一步较长期毒性和慢性毒性试验剂量、观察指标、毒性终点的选择提供依据。

4仪器和试剂

4．1仪器／器械

实验室常用解剖器械、电子天平、生物显微镜、检眼镜、生化分析仪、血球分析仪、凝血分析仪、尿液分析仪、离心机、石蜡切片机等。

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GB15193．22—2014

4．2试剂

甲醛、二甲苯、乙醇、苏木素、伊红、石蜡、血球分析仪稀释剂、生化分析试剂、凝血分析试剂、尿液分析试剂等。

5试验方法

5．1受试物

受试物应使用原始样品，若不能使用原始样品，应按照受试物处理原则对受试物进行适当处理。将受试物掺入饲料、饮用水或灌胃给予。

5．2实验动物

5．2．1动物选择

实验动物的选择应符合GB14922．1和GB14922．2的有关规定。选择已有资料证明对受试物敏感的物种和品系，一般啮齿类动物首选大鼠，非啮齿类动物首选犬(通常选用Beagle犬)。大鼠周龄推荐不超过6周，体重50g~100g。试验开始时每个性别动物体重的差异不应超过平均体重的±20％。每组动物数不少于20只，雌雄各半；若计划试验结束做恢复期的观察，应增加动物数(对照和高剂量增加卫星组，每组10只，雌雄各半)。犬应选用4个月~6个月幼犬，试验开始时每个性别动物体重差异不应超过平均体重的±20％，每组动物数不少于8只，雌雄各半；若计划试验结束做恢复期的观察，应增加动物数(对照和高剂量增加卫星组，每组4只，雌雄各半)。对照组动物性别和数量应与受试物组相同。

5．2．2动物准备

试验前大鼠在实验动物房至少应进行3d~5d(犬7d~14d)环境适应和检疫观察。

5．2．3动物饲养

实验动物饲养条件应符合GB14925、饮用水应符合GB5749、饲料应符合GB14924的有关规定。试验期间动物自由饮水和摄食，推荐单笼饲养，大鼠也可按组分性别分笼群饲，每笼动物数(一般不超过3只)应满足实验动物最低需要的空间，以不影响动物自由活动和观察动物的体征为宜。试验期间每组动物非试验因素死亡率应小于10％，濒死动物应尽可能进行血液生化指标检测、大体解剖以及病理组织学检查，每组生物标本损失率应小于10％。

5．3剂量

5．3．1分组

试验至少设3个受试物剂量组，1个阴性(溶媒)对照组，必要时增设未处理对照组。若试验结束做恢复期观察，对照和高剂量需增设卫星组。对照组除不给受试物外，其余处理均同受试物剂量组。

5．3．2剂量设计

5．3．2．1原则上高剂量应使部分动物出现比较明显的毒性反应，但不引起死亡；低剂量不宜出现任何观察到毒效应(相当于NOAEL)，且高于人的实际接触水平；中剂量介于两者之间，可出现轻度的毒性效应，以得出LOAEL。一般递减剂量的组间距以2倍