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3.2细胞器之间的分工合作(第二课时)
一.细胞器之间的协调配合
科学方法:同位素标记法(同位素示踪法)
用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,从而示踪物质的运行规律和变化规律。
帕拉德再一次在技术上做出了重
大革新——他改进了适合蛋白质研究的细胞内同位素示踪体系,同时还发展了放射自显影的电子显微镜方法
乔治·埃米尔·帕拉德
(Palade,GeorgeEmil)
一.细胞器之间的协调配合
科学方法:同位素标记法(同位素示踪法)
用物理性质特殊的同位素来标记化学反应中原子的去向,从而示踪物质的运行规律和变化规律。
P—102
标记H₂O、CO₂研究光合产物O₂中氧原子的来源。
标记DNA研究DNA复制方式。P二54
放射性
P—48
3H标记亮氨酸,研究分泌蛋白的合成与运输过程。
研究暗反应中碳的转移途径。P—102
噬菌体的遗传物质P二44
放射性
同位素
稳定
同位素
14C标记CO₂,标记DNA
标记蛋白质.
3H
14C
32P
35S
180
15N
同位
素标
记L
密度或相对分子质量
检测
检测
.细胞器之间的协调配合
1.分泌蛋白
有些蛋白质是在细胞内合成后,分泌到细胞外起作用的,这类蛋白质叫做分泌蛋白,如消化酶、抗体和一部分激素。
比较项目
分泌蛋白
细胞内蛋白
不同点
作用
部位
细胞外
细胞内
举例
抗体、消化酶和一部
分激素等
有氧呼吸相关的酶、光合
作用相关的酶等
相同点
基本组成单位都是氨基酸,都需要核糖体参与合成
一
一.细胞器之间的协调配合
2.细胞器之间的协调配合
(1)实验材料:豚鼠胰腺
选材原因:拥有大量分泌细胞,这些分泌细胞存在大量粗糙内质网,并且还发现胰腺分泌细胞中的酶原颗粒可作为消化酶的暂时储存位点
(2)实验操作:首先为哺乳动物注射放射性同位素标记的氨基
酸(³H标记亮氨酸),然后分离亚细胞成分,以观察新合成的带有放射性标记的蛋白质动力学特征。
(3)实验结果
囊泡线粒体
高尔基体
核糖体
内质网
组织固定切片由电子显微镜进行放射自显影,大多数标记的蛋白质是在粗糙的内质网上
117分钟的追逐后,大部分蛋白质出现在靠近细胞膜内侧的囊泡中,以及释放到细胞外
经过17分钟的追逐,发现大多数标记的蛋白质已经转移到高尔基体囊泡
豚鼠胰腺腺泡细胞分泌蛋白形成过程图解
(灰点代表未被标记的分泌蛋白,红点代表被标记的分泌蛋白)
一.细胞器之间的协调配合
117min
17min
3min
①首先,在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。
②当合成了一段肽链后,这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续其合成过程,并且边合成边转移到内质网腔内,再经过加工、折叠,形成具有一定空间结构的蛋白质。
③内质网膜鼓出形成囊泡,包裹着蛋白质离开内质网,到达高尔基体,与高尔基体膜融合,囊泡膜成为高尔基体膜的一部分。
④高尔基体还能对蛋白质做进一步的修饰加工,然后由高尔基体膜形成包裹着蛋白质的囊泡。囊泡转运到细胞膜,与细胞膜融合,将蛋白质分泌到细胞外(图3-8)。
在分泌蛋白的合成、加工、运输的过程中,需要消耗能量。这些能量主要来自线粒体。
高尔基体在其中起着重要的交通枢纽作用。
一.细胞器之间的协调配合
(4)分泌蛋白合成的大致过程
内质网
合成的蛋白质
高尔基体
囊泡
图3-8分泌蛋白运到细胞外的过程示意图
(①~⑦表示运输的顺序)
细胞核
一.细胞器之间的协调配合
(4)分泌蛋白合成的大致过程
核糖体内质网囊泡高尔基体囊泡细胞膜
内质网形成囊泡将
蛋白质运送到高尔
基体,导致内质网
的膜面积减少
囊泡与高尔基体融合,导致高尔基体的膜面积增加
来自高尔基体的囊泡与细胞膜融合,导致细胞膜的膜面积增
加,分泌蛋白释放到细胞外
高尔基体形成囊泡移动到细胞膜,导致高尔基体的膜面积减少
综合比较:高尔基体的膜面积基本不变
一.细胞器之间的协调配合
(4)分泌蛋白合成的大致过程
较成熟蛋白质→成熟蛋白质→分泌蛋白
mRNA
作为模板
脱水缩合盘曲折叠
氨基酸多肽
线粒体(功能)
细胞核
(转录)
核糖体
(翻译)
运输
加工
运输
加工
高尔基体
内质网
细胞膜
场所
分泌
囊泡
β折叠
α螺旋
泡
一.细胞器之间的协调配合
(4)分泌蛋白合成的大致过程
A.该过程的研究手段——放射性同位素标记法,3H标记亮氨酸,
放射性最先出现在核糖体,然后依次出现在内质网、高尔基体和
核糖体内质网
高尔基体
时间
附有核糖体的
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