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雷帕霉素通过mTOR途径抑制大鼠脉络膜新生血管生长的作用机制

摘要

目的：

通过氪激光光凝，建立Brown-Norway大鼠脉络膜新生血管（CNV）动物模型，

并检测大鼠脉络膜新生血管HIF-1α、VEGF以及p70S6k的表达，明确雷帕霉素对脉络

膜新生血管形成的抑制作用并研究其作用机制。

方法：

选取雄性Brown-Norway大鼠，用647nm氪激光光凝诱导，建立实验性脉络膜新

生血管模型。于光凝后第7、21d行眼底FFA和苏木素/依红（HE）染色，观察脉络膜

新生血管形成情况及相应组织病理变化，判断造模是否可靠。造模成功后，将第二批

BN大鼠随机分为正常对照组、模型组、雷帕霉素低浓度给药组和雷帕霉素高浓度给药

组。用同样方法建立实验性CNV模型。向雷帕霉素低浓度、高浓度组分别腹腔注射

0.20.6mg/kg/d

雷帕霉素和，相同体积的生理盐水经腹腔注射给模型组和正常对照组。

721dFFACNVIODHE

给药后第、时行，计算渗漏率及荧光渗漏光密度（）值；选择

染色观察组织形态变化，并通过测量CNV厚度评价CNV形成；PT-PCR、Westernblot

检测各组在第7、21d时HIF-1α、VEGF和p70S6k的表达水平。

结果：

FFA7dCNV

示光凝后第，激光光凝处可见荧光素点状渗漏，提示已形成；随时间

721dIOD

增加渗漏逐渐增强，逐渐呈渗漏环样改变。光凝后第、，雷帕霉素两给药组

P0.05

值均较模型组降低，差异有统计学意义（＜）；与低浓度给药组相比，高浓度给

IODP0.05HE7d

药组值减小，差异有统计学意义（＜）。显示，第时与模型组相比，

雷帕霉素两给药组CNV厚度均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与低浓度给药

组相比，高浓度给药组CNV厚度降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；第21d也是

如此。qPCR显示，第7d时与模型组相比，雷帕霉素两给药组HIF-1α、VEGF和p70S6k

的mRNA表达量均降低，差异有统计学意义（P＜0.05）；与雷帕霉素低浓度给药组相

比，雷帕霉素高浓度给药组表达量减少（P＜0.05）；第21d时，与模型组相比，雷帕

霉素各给药组mRNA表达量均下降（P＜0.05）；与雷帕霉素低浓度给药组相比，高浓

度给药组表达量减少（P＜0.05）。Westernblot检测显示雷帕霉素两给药组HIF-1α、

I

VEGF和p70S6k的蛋白表达水平无论在第7d还是第21d都是较模型组降低，与qPCR

结果相符，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论：

1.氪激光可以诱导BN大鼠形成脉络膜新生血管动物模型，该模型成模率较高，制

作时间较短，是研究脉络膜新生血管形成的较好动物模型。

2.雷帕霉素可以抑制BN大鼠脉络膜新生血管的形成和发展，其作用可能是通过

mTORHIF-1αVEGFp70S6k

通路，下调、和的表达实现。

3.AMDCNV

雷帕霉素可作为治疗等相关疾病的一种潜在候选药物。

硕士研究生：李艳秋（眼科学）