副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_1裂解酶的生物信息学分析、原核表达及生物活性鉴定.pdfVIP

※生物工程食品科学2025,Vol.46,No.0383

副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_1裂解酶的生物

信息学分析、原核表达及生物活性鉴定

张德福，杨雯静，刘可，刘青青，白梧桐，李凡，吕欣然，柏雪，檀茜倩，李学鹏，励建荣*

（渤海大学食品科学与工程学院，渤海大学海洋研究院，生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心，

辽宁省食品安全重点实验室，辽宁锦州121013）

摘 要：为了研究副溶血性弧菌噬菌体vB_VpP_1裂解酶重组表达后对副溶血性弧菌的体外裂解作用，本实验根

据全基因组测序及功能分析结果初步判断噬菌体vB_VpP_1的gp32基因片段为裂解酶基因，使用Expasy等工具分

析了gp32的氨基酸序列组成和结构等；使用Primer5.0软件设计引物后克隆至pET-28a（＋）载体进行原核表达；

纯化后的裂解酶作用于宿主菌及乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）处理后的宿主菌，测

定裂解酶的活性。结果表明，vB_VpP_1裂解酶的三级结构为球形亲水蛋白，预测含有2个催化结构域，符合革

兰氏阴性菌噬菌体裂解酶的基本特征，不存在跨膜区域及信号肽。纯化后的噬菌体vB_VpP_1裂解酶活力约为

/

（1487±182）Umg，对已被EDTA破坏细胞壁外膜的副溶血性弧菌表现出较强的裂解能力，但不能有效裂解细胞

壁完好的副溶血性弧菌。本研究成功构建噬菌体vB_VpP_1裂解酶原核表达载体，表达、纯化后的裂解酶能够裂解

细胞壁被破坏的副溶血性弧菌。

关键词：副溶血性弧菌；噬菌体；裂解酶；生物抗菌剂；食品安全

BioinformaticsAnalysis,ProkaryoticExpressionandBiologicalActivityofLysinfrom

VibrioparahaemolyticusPhagevB_VpP_1

ZHANGDefu,YANGWenjing,LIUKe,LIUQingqing,BAIWutong,LIFan,LÜXinran,BAIXue,TANXiqian,LIXuepeng,LIJianrong*

(InstituteofOceanResearch,NationalandLocalJointEngineeringResearchCenterofStorage,ProcessingandSafetyControl

TechnologyforFreshAgriculturalandAquaticProducts,FoodSafetyKeyLabofLiaoningProvince,

CollegeofFoodScienceandEngineering,BohaiUniversity,Jinzhou121013,China)

Abstract:TostudytheinvitrocleavageeffectofarecombinantlysinfrombacteriophagevB_VpP_1onVibrio

parahaemolyticus,thegp32genefragmentofvB_VpP_1wasidentifiedasalysingeneaccordingtotheresultsofwhole-

genomesequencing(WGS)andfunctionalanalysis.Theaminoacidsequenceandstructureofgp32wereanal