核酸的理化性质杨霈瑶76课件.pptxVIP

《生物化学》精品在线开放课程核酸的理化性质主讲：杨霈瑶

一、核酸的一般性质核酸因含有酸性的磷酸基和碱性的碱基，是两性电解质。一般表现为酸性。DNA是线性高分子，因此黏度极大，RNA分子远小于DNA分子，故黏度也小得多。DNA和RNA不溶于乙醇等有机溶剂，微溶于水，二者均属于极性化合物。溶液中的核酸分子在引力场中可以下沉。

二、核酸的紫外吸收核酸在波长260nm处有强烈的吸收，是由碱基的共轭双键所决定的。这一特性常用作核酸的定性和定量分析。

二、核酸的紫外吸收DNA或RNA的定量A260=1.0相当于50μg/ml双链DNA(dsDNA)40μg/ml单链DNA(ssDNAorRNA)20μg/ml寡核苷酸确定样品中核酸的纯度 纯DNA:A260/A280=1.8 纯RNA:A260/A280=2.0紫外吸收的应用

三、核酸的变性与复性DNA的变性：某些理化因素导致DNA双链互补碱基对之间的氢键发生断裂，DNA双链解离为单链的过程。定义DNA变性的本质是双链间氢键的断裂。

三、核酸的变性与复性增色效应：DNA变性时其溶液OD260增高的现象。DNA解链时的紫外吸收变化

三、核酸的变性与复性DNA的解链曲线连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。解链温度(Tm)：解链过程中，紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。

三、核酸的变性与复性G+C含量越高，解链温度就越高。解链曲线的变化

三、核酸的变性与复性当变性条件缓慢地除去后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构，这一现象称为DNA复性。减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火。

三、核酸的变性与复性不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链。这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。核酸分子杂交

三、核酸的变性与复性

三、核酸的变性与复性研究DNA分子中某一种基因的位置。鉴定两种核酸分子间的序列相似性。检测靶基因在待检样品中存在与否。核酸分子杂交的应用

感谢观看