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;核心目的;一、动物细胞培养的条件和过程
1.动物细胞培养的条件;温度、pH和渗透压;2.动物细胞培养过程;1.下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是()
A.把组织分散成单个细胞的过程
B.从机体取得组织分散后立即进行培养的过程
C.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程
D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程;B解析:用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程,可以是原代培养,也可以是传代培养,A错误;原代培养是指从动物体取得的组织用胰蛋白酶分散成单个细胞后立即培养,直到细胞出现接触抑制为止,因此从机体取得组织分散后立即进行培养的过程是原代培养,B正确;出现接触抑制现象后,取下的细胞的培养过程是传代培养,C错误;哺乳动物细胞培养过程中具有贴壁生长的特点,D错误。;2.中国科学院的研究人员将人的多能干细胞通过体细胞诱导培养出全能干细胞(相当于受精卵发育3天的状态),使得“成年”版本的细胞逆向转化为具有更多可能性的“婴儿期”版本的细胞。该全能干细胞比囊胚期细胞(相当于受精卵发育5~6天的状态)具有更强的发育潜力,是目前全球体外培养的“最年轻”的人类细胞。下列说法错误的是()
A.培养全能干细胞时需将其置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中;B.多能干细胞具有分化成多种细胞或组织的潜能,但不具有发育成完整个体的能力
C.囊胚的内细胞团将发育成胎盘和胎膜
D.病人利用自身全能干细胞诱导得到的器官进行移植可以更好地避免免疫排斥反应;C解析:培养全能干细胞过程中,需将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中,CO2的主要作用是维持培养液的pH,A正确;多能干细胞具有分化成多种细胞或组织的潜能,但不具有发育成完整个体的能力,B正确;囊胚分为内细胞团和滋养层,其中内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,滋养层将来发育为胎膜和胎盘,C错误;自体移植不会引起免疫排斥问题,病人利用自身全能干细胞诱导得到的器官进行移植可以更好地避免免疫排斥反应,D正确。;二、动物细胞融合技术与单克隆抗体
1.动物细胞融合技术
(1)理论基础:细胞膜的流动??。
(2)诱导方法:PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。
(3)优点:细胞融合技术突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。目前,种间、属间、科间,甚至动物和植物之间的细胞融合已获得成功。;2.单克隆抗体
(1)单克隆抗体的制备
①过程;②杂交瘤细胞的特点:既能迅速大量繁殖,又能产生单一抗体。
(2)单克隆抗体的优点:特异性强、灵敏度高、产量大。
(3)单克隆抗体的应用
①作为诊断试剂:准确识别各种抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合,并且可以大量制备。
②用于治疗疾病和运载药物:制成抗体—药物偶联物。;3.人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早期妊娠的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,下列叙述错误的是();A.制备抗HCG单克隆抗体过程中用到的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合
B.将纯化的HCG注入小鼠体内是为了从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得能产生特定抗体的B淋巴细胞
C.图中使用的HAT培养液具有选择作用,可以让能合成抗HCG抗体的细胞大量增殖
D.在小鼠腹水中收集抗HCG单克隆抗体时,需要注射免疫抑制剂,使小鼠易于接纳杂交瘤细胞;C解析:制备单克隆抗体过程中要用动物细胞培养技术培养B淋巴细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞,用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞,A正确;在制备单克隆抗体过程中,首先要将纯化的HCG注入小鼠体内,其目的是从产生免疫反应小鼠的脾脏中获得能产生特定抗体的B淋巴细胞,B正确;题图中利用HAT培养液的目的是筛选出杂交瘤细胞,但筛选出的杂交瘤细胞不一定能产生抗HCG抗体,C错误;可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖,从小鼠腹水中收集抗HCG单克隆抗体,此过程需要注射免疫抑制剂,降低小鼠的免疫能力,使小鼠易于接纳杂交瘤细胞,D正确。;4.双抗体夹心法(如下图)是医学上常用的定量检测抗原的方法,利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性,下列相关叙述正确的是()
A.将相关抗原注射到小鼠体内,可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体
B.固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于两者结构相同
C.加入酶标抗体的目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量
D.该方法与只使用一种单克隆抗体相比,能增加识别抗原的种类;C解析:将相关抗原注射到小鼠体内,可从小鼠脾脏中获得能产生相应抗体的B淋巴细胞,而单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的,A错误;据题图可知,固相抗体和酶标抗体分别与抗原的不同部位结合,说明两者的结构不同,B错误;加入酶标抗
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