基于桥联递送制备姜黄素-大豆蛋白-锌三元复合物及其神经保护作用研究.pdfVIP

摘要

随着我国人口老龄化程度的不断加剧，神经退行性疾病（Neurodegenerativediseases,

NDs）的发病率呈上升趋势，脑健康领域受到了人们的广泛关注。近年来膳食营养与健

康成为国内外关注的焦点，《“健康中国2030”规划纲要》的发布推动了国内普通食品功

能化的发展进程，随着人们合理膳食和营养均衡的意识逐步提升，脑健康营养补剂的需

求不断增加，相关功能因子的开发具有重要意义。

姜黄素-锌复合物具有潜在的神经保护活性，但是目前以有机合成为主，限制了其在

功能性食品开发方面的应用。近年来，随着胶体颗粒和纳米递送等研究的不断发展，蛋

白递送体系在功能因子稳态方面显示出巨大应用前景，基于此，本研究以大豆分离蛋白

（SoyProteinIsolate，SPI）为原料，根据姜黄素在碱性pH下脱质子的特性，利用pH驱

动结合金属配位作用成功制备了姜黄素-SPI-锌三元复合物，并探究其形成机制。进一步

分析三元复合物的环境稳定性及其胃肠消化特性，初步探究了复合物在体外细胞模型中

的神经保护活性。最后以斑马鱼作为模型生物，探究三元复合物的神经保护效果并从线

粒体功能角度分析其可能机制，以期为开发具有神经保护作用的功能性食品提供策略。

主要研究内容和结论如下：

（1）以SPI、姜黄素（Curcumin，Cur）及硫酸锌（ZnSO）为原料，探究利用pH

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驱动结合金属配位作用实现姜黄素和锌共荷载的可行性。通过调整姜黄素与ZnSO4的添

加比例（Cur/ZnSO，1:0-1:2，w/w），SPI与姜黄素比例（SPI/Cur，2:1-50:1，w/w）及配

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位反应pH（pH12.0-pH8.0）成功制备姜黄素-SPI-锌三元复合物。动态光散射技术（DLS）

结合扫描电子显微镜（FE-SEM）以及元素分析（EDS）结果表明，当Cur/ZnSO4为1:0-

1:1，SPI/Cur为5:1-50:1，反应pH为pH8.0，可制备80-140nm，尺度均一（Polydispersity

index，PDI0.32）的三元复合物，其中姜黄素荷载率和锌结合率均可达80%。进一步利

用X射线衍射（XRD），X射线光电子能谱（XPS），荧光光谱和红外光谱（FTIR）探究

复合物的形成机制。结果表明，SPI可作为“桥梁”实现姜黄素与锌的共荷载，三者存在

相互作用，其中SPI与姜黄素存在氢键和疏水相互作用，与锌存在配位作用和静电相互

作用，而姜黄素与锌之间也存在配位和静电相互作用，且作用强度受ZnSO添加量的影

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响。此外，Zn2+可改变SPI构象及姜黄素所处环境的极性，影响复合物的结构。

（2）进一步分析不同Cur与ZnSO比例下（Cur/ZnSO，1:0-1:1，CZ1-CZ5）所制

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备的姜黄素-SPI-锌三元复合物的环境稳定性与模拟胃肠道消化特性，并在细胞水平探究

其潜在神经保护活性。研究结果表明：与姜黄素和锌的物理混合样品（Cur-Zn-mix）相

比，三元复合物经高温（95℃，30min），紫外（8w，30min）处理后，其姜黄素及锌

的保留率显著提高至61%-96%，且在高离子强度（800mM）下能够基本保持胶体颗粒

的均一度。形成三元复合物可有效减少姜黄素在模拟胃肠道消化过程中的降解和沉淀，

整体可提高姜黄素的体外生物可及性，其提升程度与ZnSO4添加量呈一定正相关。进一

步利用6-OHDA处理PC12细胞构建神经损伤模型，与Cur-Zn-mix相比，经三元复合物

预保护的PC12细胞整体细胞存活率显著提升（60%-83%）、胞内活性氧（ROS）水平及

脂质过氧化程度显著下降，同时线粒体膜电位降低程度减少，表明具有潜在的神经保护

活性，其中姜黄素和锌具有协同作用且在一定姜黄素浓度下与复合物中锌含量呈一定正

相关，当Cur/ZnSO达到1:0.75（CZ4），效果最优。