化妆品中乳糖酸的测定超高效液相色谱—串联质谱法.docxVIP

1

化妆品中乳糖酸的测定超高效液相色谱—串联质谱法

1范围

本方法规定了超高效液相色谱-串联质谱法测定化妆品及化妆品原料中乳糖酸的含量。

本方法适用于水剂、乳液、膏霜类化妆品及化妆品原料中乳糖酸含量的测定。（主要用于护肤品中）

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

GB/T37625-2019化妆品检验规则。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

以纯水提取化妆品及化妆品原料中乳糖酸，用超高效液相色谱分离，经质谱进行检测，外标法定量。

5试剂和材料

5.1除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。

5.2甲醇：质谱纯试剂。

5.3甲酸：色谱纯试剂。

5.4标准品：乳糖酸。化学名称、分子式、相对分子质量和CAS编号见附录A。

5.5容量瓶：10mL、100mL。

5.6具塞比色管：25mL。

5.7无针注射器：1mL。

5.8滤膜：0.22μm。

5.9样品瓶：1.8mL。

5.10标准储备溶液：称取乳糖酸（5.4）10mg（精确到0.00001g）于100mL容量瓶中，用纯水（5.1）定容至刻度，配成100μg/mL乳糖酸溶液。

5.11标准溶液的制备：准确吸取适量的储备液（5.10）至10mL的容量瓶，用纯水定容至刻度线，充分摇匀，得到混合系列标准溶液（至少5个浓度）。

6仪器和设备

6.1液相色谱仪，配有质谱检测器。

6.2电子天平：感量0.01mg；感量0.1mg。

6.3超声清洗仪。

6.4涡旋混合器。

7分析步骤

7.1样品处理

2

水剂、水包油产品：称取0.1g样品（精确到0.001g）于25mL具塞比色管中，加入1mL纯水，涡旋混匀30s，加入纯水定容至刻度，超声溶解20min，如有需要，可进一步稀释，最后浓度的样品取1mL用0.22μm滤膜过滤至样品瓶，待测。

油包水产品：称取0.1g样品（精确到0.001g）于25mL具塞比色管中，加入1mL异丙醇，涡旋混匀30s，加入纯水定容至刻度，超声溶解20min，如有需要，可进一步稀释，最后浓度的样品取1mL用0.22μm滤膜过滤至样品瓶，待测。

7.2分析测定条件

7.2.1色谱条件

以下分析条件可供参考，色谱梯度洗脱程序见表1，采用其他条件应验证其适用性。

——色谱柱：ACQUITYUPLCHSST3（2.1mm×100mm，1.8μm），或同等性能的C18色谱柱。

——柱温：35℃。

——进样量：1μL。

——流动相：流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为0.1%甲酸甲醇溶液。

——流速：0.35mL/min。

表1色谱梯度洗脱程序

时间

流速/mL·min-1

流动相A/%

流动相B/%

0

0.35

99

1

1

0.35

70

30

1.5

0.35

70

30

3

0.35

20

80

3.1

0.35

99

1

6.5

0.35

99

1

7.2.2质谱条件

以下分析条件可供参考，质谱条件见表2，采用其他条件应验证其适用性。——离子源：电喷雾离子源，负离子（ESI-）。

——毛细管电压：2500V。

——锥孔电压：60V。

——离子源温度：150℃。

——锥孔气流：50L/Hr。

——脱溶剂温度：450℃。

——去溶剂化气流：750L/Hr。

表2质谱条件

化合物

锥孔电压（V）

定量离子对/（m/z）

碰撞能量（V）

定性离子对/（m/z）

碰撞能量（V）

乳糖酸

60

357/59

32

357/75

24

357/89

24

7.2.3样品的定性分析

取试样溶液与标准工作溶液在相同试验条件下测定，试样溶液中待测组分的保留时间与标准溶液中对应组分的保留时间一致，且定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应组分的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表3规定的范围，即可判定试样中存在该组分。

表3相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度（k）

k50%

50%≥k20%

20%≥k10%

k≤10%

允许的最大偏差

±20%

±25%

±30%

±50%

7.2.4样品的定量分析

3

在“7.2.1”