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巴贝斯虫病诊断方法分析综述

目前临床上最常用最经济的贝斯虫病诊断方法是用光学显微镜观察红细胞内有无血液寄生虫（BoozerAL，2003）。如果镜下观察到虫体即可确诊，但是检出率比较低，大多数可能需要一些运气，加上丰富的临床经验才能观察到虫体。尤其是对于无临床症状的患病动物及寄生虫血症低的动物，通常很难直接从血涂片上发现虫体。疾病检查需要经过Minimumdatabase（MDB）外加分子生物学或血清学检查。具体检查如下（1）临床检查：贫血、血小板降低、运动不耐受、淋巴结肿大、黄疸、尿血、精神沉郁、可视粘膜苍白、（2）实验室检查：RBC值小于5.5RBC×1012/L、ALT、TBIL、GGT、BUN数值高于正常值。影像学检查是否脾脏增大回声降低，肝脏增大回声增强，肾脏皮质髓质回声是否正常。如果大部分检查都结果都与上述特征相似，在临床上可以高度怀疑患巴贝斯虫病。但是临床有些疾病也会造成相似的临床症状，在血涂片中未发现巴贝斯虫的前提下，很难进行精确的诊断。但随着血清学和分子生物的发展，一些新的检查方法也开始应用于巴贝斯虫的诊断，相比于传统诊断此方法灵敏度特异性更高。精确的诊断可以在感染的第一天就可以通过血清学或分子生物进行快速精确诊断巴贝斯虫病。

1.1病原诊断

临床上通过医生问诊、触诊和实验室临床检查。以及借助电子显微镜检测血液涂片中是否检出巴贝斯虫，是宠物临床诊断中最快捷、经济、实用的临床诊断方法。资料上显示在耳朵处采血，涂片检检出巴贝斯虫概率较其他血液内寄生虫概率更高(Solano-Gallegoetal，2016)。将染色后的血涂片在光学显微镜下查看寻找巴贝斯虫。若找到巴贝斯虫即可确诊，大多数可能需要一些运气，加上丰富的临床经验才能观察到虫体。在进行血液涂片镜检的同时，还需进行血常规检查、生化分析、尿检、血清学检查、分子生物学检查等。由于贫血的原因，血液检查中红细胞相关指标将不同程度降低。统计学结果100%患病动物会出现RBC低于正常范围、80.4%患犬HCT降低到正常范围、而61.4%出现PLT降低到正常范围之下(Leeetal，2009)。在发病潜伏期生化数值因为机体代偿一般都是正常的，但是在疾病发展过程中器官损伤加剧可能会出现低蛋白血症、GLU、排尿异常等情况。这是肝脏细胞和肾脏损伤的结果(Schetters,TPetal，2009)。在尿液检查中，尿沉渣检查可能会看到白细胞、红细胞及细胞管型的出现；通过尿液试纸条检查可能发现血红蛋白尿。长时间肾损伤会对肾脏造成不可逆的伤害以及机体酸碱失衡。但是在宠物临床上采集尿液收到动物自身、动物性格、医疗技术、动物主人等原因影响，尿液检查的检查次数并不多，因此存在统计数据不具有代表性。

1.2血清诊断

血清学诊断对于诊断巴贝斯虫也有优势，如间接免疫荧光检测(IFAT)(董君艳等，2002)或酶联免疫吸附测定(ELISA)(Solano-GallegoLetal，2011)。应用血清学检测到的最大优点是，我们能够确定血液中是否有抗体存在，如果有极大可行性可以确定可能是巴贝斯虫感染者。但是不同实验室抗体滴度没有统一标准，影响结果的判读。动物无临床症状而抗体阳性因此不能单独应用此方法进行诊断。动物处于急性感染或者免疫异常的情况下可能会出现假阴性和假阳性的实验结果。实验结果只显示阴性、阳性，并不能提供抗体滴度数值(SainzAetal，2015)。不同品种巴贝斯虫在血清学上有交叉反应，所以不能确定感染的种类。因此血清学需要进一步发展。但是他的优势是其他检查比不了的，那就是实验检查用时时间短。

1.3分子生物学诊断

分子生物学的应用，在疾病诊断方面具有高灵敏性和特异性。对动物体内核酸进行精确检测。有些动物在感染过程之中不会产生抗体，这时候血清学诊断检查结果不可信，这时候可以应用分子生物学诊断。聚酶链反应（PCR）它彻底改变了宠物医生诊断方式。

由于PCR的问世，使得在疾病的诊断上有了精确的数据支撑可以进行精确诊断。